Deubiquitinating Enzyme Inhibitors Block Chikungunya Virus Replication
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Fecha
2023
Título de la revista
Publicado en
Viruses, 1999-4915, 15(2), 2023, 481
Publicado por
Multidisciplinary Digital Publishing Institute (MDPI)
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Resumen
Los procesos de ubiquitinación y desubiquitinación intervienen ampliamente en la modulación de la función, actividad, localización y estabilidad de múltiples proteínas celulares que regulan casi todos los aspectos de la función celular. Se ha demostrado que varias familias de virus explotan el sistema de conjugación de la ubiquitina celular para lograr una infección productiva: entrar en la célula, promover la replicación del genoma o ensamblar y liberar progenie viral. En este estudio, analizamos el papel de las enzimas deubiquitinadoras (DUBs) durante la infección por el virus chikungunya (CHIKV). Se trataron células HEK293T, Vero-E6 y Huh-7 con dos inhibidores de DUB (PR619 o WP1130). A continuación, se evaluaron las células infectadas mediante citometría de flujo y se cuantificó la progenie viral mediante el método de ensayo en placa. Los cambios en las proteínas virales y el ARN viral se analizaron mediante Western blot y RT-qPCR, respectivamente. Los resultados indican que el tratamiento con inhibidores de DUB perjudica la replicación del CHIKV debido a una desregulación significativa de la síntesis de proteínas y ARN viral. Por lo tanto, la actividad DUB puede ser una diana farmacológica para bloquear la infección por CHIKV.
Descripción
Abstract
Ubiquitination and deubiquitination processes are widely involved in modulating the function, activity, localization, and stability of multiple cellular proteins regulating almost every aspect of cellular function. Several virus families have been shown to exploit the cellular ubiquitinconjugating system to achieve a productive infection: enter the cell, promote genome replication, or assemble and release viral progeny. In this study, we analyzed the role of deubiquitinating enzymes (DUBs) during chikungunya virus (CHIKV) infection. HEK293T, Vero-E6, and Huh-7 cells were treated with two DUB inhibitors (PR619 or WP1130). Then, infected cells were evaluated by flow cytometry, and viral progeny was quantified using the plaque assay method. The changes in viral proteins and viral RNA were analyzed using Western blotting and RT-qPCR, respectively. Results indicate that treatment with DUB inhibitors impairs CHIKV replication due to significant protein and viral RNA synthesis deregulation. Therefore, DUB activity may be a pharmacological target for blocking CHIKV infection.
Palabras clave
Virus chikungunya, Infección, Replicación, Ubiquitinación, Enzimas desubiquitinantes, Inhibidor de deubiquitinasa
Keywords
Chikungunya virus, Infection, Replication, Ubiquitination, Deubiquitinating enzymes, Deubiquitinase inhibitor