Restoring expression of MIR-7 by targeted bacterial minicells inhibits the MAPK/ERK pathway and offers a novel therapy for adrenocortical cancer
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Fecha
2014
Título de la revista
Publicado en
Asia-Pacific Journal of Clinical Oncology, 1743-7563, Vol 10, No. S7, 2014, p. 21
Publicado por
Wiley
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Resumen
Antecedentes: el cáncer adrenocortical metastásico (ACC) tiene un mal pronóstico con opciones de tratamiento limitadas. Los estudios piloto de nuestro laboratorio han identificado una serie de microARN, incluido el microARN-7 (miR-7), que están significativamente subexpresados en la ACC en comparación con la corteza suprarrenal normal, lo que implica la participación de los microARN en la patogenia de la ACC y su potencial como una diana terapéutica.
Objetivos: establecer el papel y los mecanismos de miR-7 como supresor de tumores en ACC y evaluar el papel de la terapia de reemplazo de miR-7, administrada a través de minicélulas bacterianas como un tratamiento novedoso.
Métodos: el reemplazo de miR-7 se realizó en líneas celulares ACC (H295R, SW-13) en sistemas de cultivo celular 2D y 3D. Se estableció un modelo de xenoinjerto de ratón utilizando la línea celular H295R y cultivos celulares primarios y se administró terapia de reemplazo de microARN sistémico en minicélulas/vehículos de administración (EDV) EnGeneIC dirigidos a EGFR derivados de bacterias.
Resultados: El papel de miR-7 como supresor de tumores in vitro se confirmó después de que el reemplazo condujo a una reducción de la proliferación celular y la migración celular (P < 0.05). El análisis del ciclo celular mostró que esto se debe a la detención de G1 (P < 0,05) sin diferencias en las tasas de apoptosis. Se encontró que los objetivos predicados de miR-7, EGFR y C-Raf, después del reemplazo, tenían una expresión reducida de ARNm y proteínas (P < 0.05). Los ensayos de informes de luciferasa confirmaron las secuencias de unión de semillas de EGFR y C-Raf como objetivos de miR-7. La terapia de reemplazo de miR-7 en un modelo de xenoinjerto de ratón causó un crecimiento tumoral significativamente reducido en comparación con los ratones tratados con control sin evidencia de toxicidad y una expresión reducida de ARNm de C-Raf y mTOR (P < 0.05).
Conclusiones: miR-7 actúa como un supresor de tumores en ACC al inhibir la vía MAPK/ERK y la terapia de reemplazo cuando se administra a través de minicélulas dirigidas ofrece un gran avance potencial en el tratamiento de esta malignidad mortal.
Descripción
Abstract
Background: Metastatic adrenocortical cancer (ACC) has a poor prognosis with limited treatment options. Pilot studies from our lab have identified a number of micro-RNAs, including microRNA-7 (miR-7) that are significantly under-expressed in ACC versus normal adrenal cortex, implying the involvement of microRNAs in the pathogenesis of ACC and its potential as a therapeutic target.
Aims: To establish the role and mechanisms of miR-7 as a tumour suppressor in ACC and to assess the role of miR-7 replacement therapy, delivered via bacterial minicells as a novel treatment.
Methods: miR-7 replacement was performed in ACC cell lines (H295R, SW-13) in 2D and 3D cell culture systems. A mouse xenograft model was established using the H295R cell line and primary cell cultures and systemic microRNA replacement therapy was administered in bacterially derived EGFR targeted EnGeneIC delivery vehicles (EDVs)/minicells.
Results: The role of miR-7 as a tumour suppressor in vitro was confirmed after replacement lead to reduced cell proliferation and cell migration (P < 0.05). Cell cycle analysis showed this to be due to G1 arrest (P < 0.05) with no difference in the rates of apoptosis. miR-7 predicated targets, EGFR and C-Raf were found, following replacement to have reduced mRNA and protein expression (P < 0.05). Luciferase reporting assays confirmed EGFR and C-Raf seed binding sequences as miR-7 targets. miR-7 replacement therapy in a mouse xenograft model caused significantly reduced tumour growth compared to control treated mice with no evidence of toxicity and reduced mRNA expression of C-Raf and mTOR (P < 0.05).
Conclusions: miR-7 acts a tumour suppressor in ACC by inhibiting the MAPK/ERK pathway and replacement therapy when delivered via targeted minicells offers a potential major advance in the treatment of this deadly malignancy.
Palabras clave
Cáncer adrenocortical metastásico (ACC), Mecanismos de miR-7, Terapia
Keywords
Metastatic adrenocortical cancer (ACC), Mechanisms of miR-7, Therapy