Maestría en Ciencias Odontológicas

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https://hdl.handle.net/20.500.12495/60

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Examinando Maestría en Ciencias Odontológicas por Materia "Adult stem cells"

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    Efecto del ácido hipocloroso (HOCL) sobre la viabilidad y genes de auto-renovación y pluripotencia de células stem de la papila apical (SCAP)
    (2019) Escobar Villegas, Paola Andrea; Perdomo Lara, Sandra Janneth; Perdomo Rubio, Alejandro [0000-0003-1157-4045]
    Los irrigantes utilizados en endodoncia regenerativa deben promover la supervivencia, proliferación y diferenciación de células stem de la papila apical (SCAP). Las sustancias utilizadas hasta el momento han demostrado ser citotóxicas. El ácido hipocloroso (HOCl) es una solución antimicrobiana no antibiótica que estimula la proliferación celular y existe poca información relacionada con su acción sobre SCAP. Evaluar el efecto del HOCl sobre la viabilidad y estabilidad fenotípica pluripotencial de las SCAP. Se realizó obtención y caracterización de SCAP, y se determinó la concentración letal 50(CL50) del HOCl. Se evaluó el efecto sobre el ciclo celular por citometría de flujo y expresión de genes asociados a mineralización con RT-PCR, utilizando concentraciones de 143μM, 95μM y 48μM de HOCl a 1, 15 y 30 minutos de exposición. Con PCRarray se determinó la expresión de 84 genes de autorenovación y pluripotencia en SCAP expuestas a 143μM de HOCl durante 1 y 15 min. Posteriormente se realizó un análisis bioinformático con STRING V10.5. La CL50 fue 133μM(~70 ppm). Los hallazgos sugieren que el HOCl podría desencadenar una activación metabólica sobre las células, posiblemente induciéndolas hacia la mitosis. El HOCl a 143μM durante 1 y 15 min produjo sobreexpresión de OSX, DSPP y DMP-1, y tendencia a expresión a la baja de RUNX2 en los tres tiempos. El PCRarray evidenció una sobreexpresión de 9 genes en SCAP tratadas con HOCl a 143μM durante 1 minuto y de 26 genes en células sometidas a 15 min. Este último grupo mostró los mayores aumentos en la expresión de genes asociados a diferenciación, cuatro de ellos relacionados con odontogénesis (BMP4, CTNNB1, FGF10, ITGA6). Con STRING se evidenció relación de genes sobreexpresados con ocho procesos biológicos asociados a morfogénesis, diez a proliferación, nueve a diferenciación y dos a odontogénesis. En ambos grupos, estos genes también se asociaron a cuatro vías de señalización involucradas en la regulación de la formación, homeostasis y diferenciación de células stem dentales: Vía de señalización PI3K-Akt, TGF-beta, MAPK y Wnt. El HOCl a 143μM favorece la viabilidad y estabilidad fenotípica pluripotencial de las SCAP, induciendo la expresión de genes asociados a diferenciación odontoblástica y dentinogénesis.