Evaluación in vitro del fenotipo y perfil de citocinas en células dendríticas condicionadas con fibroblastos gingivales humanos retadas con Streptococcus sanguinis.

Resumen

Antecedentes: La mucosa oral se caracteriza por promover tolerancia inmunológica (TI) mediada por células dendríticas (DCs) hacia su microbiota para mantener la homeostasis tisular. Sin embargo, hasta el momento no se han identificado el o los microorganismos que inducen dicho proceso en la cavidad oral. El Streptococcus sanguinis es un posible candidato inducir una inmunomodulación en la mucosa oral por su papel en la salud. Objetivo: Evaluar in vitro el perfil de citocinas y el fenotipo efector y regulador inducido por Streptococcus sanguinis en células dendríticas condicionadas por fibroblastos gingivales. Métodos: En este estudio se aislaron y diferenciaron MonDCs, al sexto día de diferenciación, se condicionaron con medio de fibroblasto gingival humano (FGH), se estimularon con Streptococcus sanguinis y Porphyromonas gingivalis a MOI 5 y MOI 10 por 24 horas y se procedió a evaluar el fenotipo y perfil de citocinas a través de citometría de flujo. Resultados: Se obtuvo una alta expresión de CD83 en MonDCs en respuesta a P. gingivalis en comparación con los niveles obtenidos para S. sanguinis, así como altos niveles de citocinas proinflamatorias como TNF-α y bajos niveles de IL-10 en respuesta a P. gingivalis. En cambio, para S. sanguinis se obtuvo el efecto contrario. Conclusión: Los resultados de este trabajo sugieren que la respuesta de las MonDCs a S. sanguinis es menos pro-inflamatoria que a P. gingivalis, y que los sobrenadantes de las FGH juegan un papel clave en la respuesta diferencial entre estas bacterias.

Descripción

Abstract

Background: The oral mucosa is characterized by promoting immune tolerance (IT) mediated by dendritic cells (DCs) towards its microbiota to maintain tissue homeostasis. However, to date, the microorganisms that induce this process in the oral cavity have not been identified. Streptococcus sanguinis is a possible candidate to induce immunomodulation in the oral mucosa due to its role in health. Objective: To evaluate in vitro the cytokine profile and the effector and regulatory phenotype induced by Streptococcus sanguinis in dendritic cells conditioned by gingival fibroblasts. Methods: moDCs were isolated and differentiated, on the sixth day of differentiation, they were conditioned with human gingival fibroblast medium (HGF), stimulated with Streptococcus sanguinis and Porphyromonas gingivalis at MOI 5 and MOI 10 for 24 hours, the phenotype and cytokine profile were evaluated through flow cytometry. Results: A high expression of CD83 was obtained in moDCs in response to P. gingivalis compared to the levels obtained for S. sanguinis, as well as high levels of pro- inflammatory cytokines such as TNF-α and low levels of IL-10 in response to P. gingivalis. In contrast, for S. sanguinis, the opposite effect was obtained. Conclusion: The results of this study suggest that the response of moDCs to S. sanguinis is less pro-inflammatory than to P. gingivalis, and that the supernatants of HGF play a key role in the differential response between these bacteria.

Palabras clave

Célula dendrítica, Streptococcus sanguinis, Porphyromonas gingivalis, Interleucina 10

Keywords

Dendritic cell, Streptococcus sanguinis, Porphyromonas gingivalis, Interleukin 10

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