Efecto de Porphyromonas gingvalis sobre la regulación de ciclo neuronal y producción de péptidos Aβ amiloide en células neuronales SHSY5Y
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2022
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Resumen
Antecedentes: Actualmente la periodontitis es considerada factor de riesgo en la incidencia y desarrollo del Alzheimer. Se ha demostrado la presencia de especies patógenas como P. gingivalis y sus factores de virulencia, influyen en la producción e inducción de acumulación de péptidos Aβ en sangre, siendo todo esto de gran importancia para la fisiopatología del Alzheimer. Objetivo: Evaluar el efecto de la bacteria completa de P. gingivalis sobre el ciclo neuronal y producción de péptidos Aβ en células neuronales (SHSY5Y). Métodos: Es un estudio Experimental in vitro para evaluar el efecto de bacteria completa de P. gingivalis W83(ATCC® BAA-308) sobre células de neuroblastoma humano SHSY5Y (ATCC - CRL - 2266 TM. Se realizo cultivo bacteriano y estimulación con P. gingivalis en células SHSY5Y y se evaluó viabilidad por el método de rezasurina, el efecto sobre el ciclo celular y la apoptosis de células SHSY5Y mediante el método de Anexina V. Así mismo, se realizó medición de la secreción de Aβ42 en células SHSH5Y estimuladas con P. gingivalis. Resultados: Se pudo demostrar que la bacteria completa de P. gingivalis cepa W83, redujo casi en un 50% la viabilidad de las SHSY5Y a las concentraciones más altas durante 24 h. También se encontró que este patógeno produjo cambios en la distribución de las fases del ciclo celular. P. gingivalis indujo muerte celular con apoptosis temprana en las concentraciones de MOI: 5, 10, 50, 100 y lisado celular, y apoptosis tardía en las concentraciones de MOI: 5,10,100 y 200. La producción de péptido beta-amiloide fue dosis dependiente; a mayor MOI de P. gingivalis mayor producción de péptido. Conclusiones: P. gingivalis indujo disminución en la viabilidad celular, también cambio la distribución de las fases del ciclo celular, muerte celular (apoptosis temprana o tardía) y produjo péptido beta-amiloidea de manera dosis dependiente.
Descripción
Abstract
Background: Periodontitis is currently considered a risk factor in the incidence and development of Alzheimer. It has been shown that the presence of pathogens such as P. gingivalis influence production and induction of Aβ peptides in the blood, of great importance for the physiopathology of Alzheimer. It has also been informed that patients with neurodegenerative conditions show a positive regulation of proteins in the neuronal cell cycle. Objective: to evaluate the effect of the complete P. gingivalis bacteria on the neuronal cycle and Aβ peptide production of neuronal cells (SHSY5Y). Methods: Experimental in vitro study of human SHSY5Y (ATCC - CRL - 2266 TM) neuroblastoma cells and the complete P. gingivalis W83 (ATCC® BAA-308) bacteria. A culture was inoculated with P. gingivalis W83, stimulated with P. gingivalis SHSY5Y, viability of SHSH5Y stimulated with P. gingivalis W83 by resazurin method, evaluation of the effect of P. gingivalis on the cycle of SHSY5Y, evaluation of the effect of P. gingivalis on the apoptosis of SHSY5Y by means of annexin V and measurement of secretion of Aβ42 on SHSH5Y stimulated with P. gingivalis. Results: It was demonstrated that the complete P. gingivalis W83 bacteria reduced by almost 50 % the viability of SHSY5Y in the highest MOI concentrations during 24 hours. It was also found the said pathogen produced changes in the phase distribution of the cell cycle. P.gingivalis induced celular death, early apoptosis in 5, 10, 50, 100 and cell lysate MOI concentrations; late apoptosis in 5,10, 100 and 200 MOI concentrations. The production of Aβ peptides is a dependant dose proportional with the amount of MOI P. gingivalis. Conclusions: P.gingivalis induced cellular viability, changed the distribution of cellular cycles, cellular death (early or late apoptosis) and produced Aβ peptides increasing the MOI concentrations.
Palabras clave
Enfermedad de Alzheimer, Porphyromonas gingivalis, Células de neuroblastoma humano SHSY5Y, Apoptosis, Neurodegeneración
Keywords
Alzheimer disease, Porphyromonas gingivalis, SHSY5Y human neuroblstoma cells, Apoptosis, Neurodegeneration.