Caracterización de determinantes antigénicos con reactividad cruzada entre especies patógenas (P1) e intermedias (P2) del género Leptospira de la Colección de Microorganismos con Interés en Salud Animal (CMISA) del Banco de Microorganismos de Agrosavia
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2021
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Resumen
Leptospira es un género de bacterias que se encuentra distribuido a nivel mundial. Teniendo en cuenta las relaciones filogenéticas de los microorganismos pertenecientes a este género, se clasifican en cuatro subclados: P1 - patógenas, P2 – intermedias, S1 y S2 - saprófitas, siendo los dos primeros los más relevantes en la salud humana y animal. El control de la leptospirosis, enfermedad causada por estas bacterias, es de gran importancia a nivel económico especialmente en los bovinos, en los que se manifiesta con problemas reproductivos. Existen vacunas que incluyen suspensiones de bacterias inactivas, que han sido muy poco efectivas, generando inmunidad únicamente frente a los lipopolisacáridos de los serovares incluidos en la vacuna. Es por esta razón que en el presente proyecto se confirmó la identificación taxonómica de los subclados de 55 aislamientos de Leptospira, que se encuentran en la colección de microorganismos con interés en salud animal (CMISA) del Banco de Microorganismos de Agrosavia, utilizando una región del gen rrs. Fueron obtenidas proteínas leptospirales solubles, no solubles y secretadas, para establecer cuáles podrían presentar reactividad cruzada para los subclados P1 y P2, por medio de pruebas de ELISA y Western Blot. Se evidenciaron bandas de proteínas secretadas de entre 60 y 74,5 KDa, con punto isoeléctrico entre 5 y 5,4, identificadas posteriormente como Enolasa, Factor de Iniciación de la Traducción 2 y Factor de Elongación Tu. Estas proteínas detectadas de pueden representar una alternativa como candidato vacunal contra cepas intermedias y patógenas, no dependiente de serovar y que permita inmunización de bovinos a largo plazo como método de prevención de la leptospirosis.
Descripción
Abstract
Leptospira is a genus of bacteria that is distributed worldwide. Considering the phylogenetic relationships of the microorganisms belonging to this genus, they are classified into four subclades: P1 - pathogenic, P2 - intermediate, S1, and S2 - saprophytes, the first two being the most relevant in human and animal health. The control of leptospirosis, a disease caused by these bacteria, is so important especially in cattle, where it manifests with reproductive problems. There are vaccines that include inactive bacteria suspensions, which have been very ineffective, generating immunity only against the lipopolysaccharides of the serovars included in the vaccine. It is for this reason the present project confirmed the taxonomic identification of the subclades of 55 Leptospira isolates, which are found in the Collection of Microorganisms with Animal Health Interest of the Agrosavia Microorganisms Bank, using a region of the gen rrs. Soluble, not soluble and secreted leptospiral proteins were obtained to establish which could present cross reactivity for the P1 and P2 subclades, by means of ELISA and Western Blot tests. Was evidenced a secreted protein band between 60 and 74.5 KDa, with an isoelectric point between 5 and 5.4, identified later as Enolase, Translation Initiation Factor 2 and Elongation Factor Tu. This experimentally detected protein may represent an alternative as a vaccine candidate that is not serovar dependent and that allows long-term immunization of bovines as a method of preventing leptospirosis.
Palabras clave
Leptospira, P1 - patógenas, P2 - Intermedias, Proteínas leptospirales, Reactividad cruzada
Keywords
Leptospira, P1 - pathogens, P2 - intermediates, Leptospiral proteins, Cross reactivity