Descripción de un modelo de infección in vitro con virus dengue empleando células mononucleares humanas de sangre periférica

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Archivos

Tiria F.G.D., Acosta A.M.P., Castellanos J.E._2014.pdf (1.48 MB)

Fecha

2014

Autores

Título de la revista

Publicado en

Iatreia, 0121-0793, Vol. 27, num. 3, 2014, p. 267-277

Publicado por

Universidad de Antioquia

URI

https://hdl.handle.net/20.500.12495/1621

URL de la fuente

https://aprendeenlinea.udea.edu.co/revistas/index.php/iatreia/article/view/16221

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Resumen

No existen modelos animales apropiados para el estudio de la fisiopatología y las manifestacio- nes clínicas de la enfermedad causada por la infección con virus dengue, por lo que para ello se requiere desarrollar modelos experimentales. El propósito del presente trabajo fue establecer un modelo de infección in vitro con virus dengue serotipo-2 (DENV-2). Para esto se obtuvieron células mononucleares de sangre periférica (CMSP) usando un gradiente de Ficoll, y se las culti- vó e infectó con DENV-2 a una baja multiplicidad de infección. La subpoblación celular que se infectó y produjo citocinas se identificó empleando un análisis multiparamétrico por citometría de flujo. Como resultado, las CMSP fueron permisivas a la infección, que se detectó a las 24 horas de inoculado el virus. Además, en este mismo tiempo, los monocitos CD14+, pero no los linfo- citos CD3+ o CD19+, fueron la subpoblación celular preferencialmente infectada y responsable de la producción de TNF-α e IL-6. En conclusión, se estableció un modelo de infección in vitro usando CMSP no fraccionadas, en el que se identificó a los monocitos CD14+ como la principal célula blanco de la infección con DENV-2 y productora de citocinas proinflamatorias.

Descripción

Abstract

Introduction: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is able to colonize the human To date, there are no appropriate animal models for the study of the pathophysiology and clinical manifestations of the disease caused by dengue virus infection; therefore, experimen- tal models are required for that purpose. The objective of the present work was to establish a model of in vitro infection with DENV-2. To this end, human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were obtained using a Ficoll gradient, and infected with DENV-2 using a low multiplicity of infection. The cell populations infected and responsible for the production of cytokines were identified using a multiparametric analysis by flow cytometry. As a result, PBMC were permissive to infection that was detected 24 hours after virus inoculation. Additionally, at this same time, CD14+ cells, but not CD3+ or CD19+ cells, were preferentially infected and responsible for the production of TNF-α and IL-6. In conclusion, we established a model of in vitro infection using unfrac-tionated PBMC, in which CD14+ cells were identified as the primary target cells for infection with DENV-2, and the production of proinflammatory cytokines.

Palabras clave

Células mononucleares, Citometría de flujo

Keywords

Mononuclear cells, Flow cytometry

Temáticas

Virus del dengue
Factor de necrosis tumoral alfa
Fisiopatología

Citación

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