Capsazepine antagonizes TRPV1 activation induced by thermal and osmotic stimuli in human odontoblast-like cells
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Fecha
2023
Título de la revista
Publicado en
Journal of Oral Biology and Craniofacial Research, 2212-4276, 13, January 2023, 1, 71 - 771,
Publicado por
Elsevier B.V.
Craniofacial Research Foundation
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ISSN de la revista
Título del volumen
Resumen
Objetivos: El dolor dental, que es el principal motivo de consulta de los pacientes al dentista, está clasificado como un problema de salud pública. El estudio de los mecanismos celulares y moleculares que contribuyen al dolor es un elemento fundamental para desarrollar nuevos analgésicos. Mediante el uso de un antagonista selectivo en un modelo in vitro, este estudio pretendía establecer el papel del TRPV-1 en células humanas similares a odontoblastos (OLC) como diana terapéutica para el dolor dental mediado por estímulos térmicos y osmóticos nocivos. Métodos: Las OLC se diferenciaron a partir de células mesenquimales de la pulpa dental y se evaluó la expresión de TRPV1. La activación de TRPV-1 se determinó evaluando los cambios en la concentración de calcio tras la estimulación con soluciones hiperosmóticas de manitol y xilitol o DMEM calentado a 45 °C, utilizando la sonda fluorescente de calcio Fluo-4 AM. Además, los cambios en la fluorescencia (F/F0) debidos al flujo de calcio se evaluaron mediante fluorometría y citometría de flujo. Simultáneamente, las células fueron coestimuladas con el antagonista selectivo capsazepina (CZP). Resultados: Las OLC expresaron DSPP y DMP-1, confirmando su fenotipo celular. Se expresó TRPV1, y su activación por diferentes estímulos produjo un aumento del Ca2+ citosólico que fue reducido por el antagonista. Los dos métodos utilizados para evaluar la activación del TRPV1 mediante la medición de la fluorescencia de la sonda de calcio mostraron patrones similares. Conclusiones: Estos resultados sugieren que la modulación del TRPV-1 mediante un antagonista puede implementarse como estrategia farmacológica para el manejo del dolor dental mediado por estímulos hiperosmóticos y térmicos.
Descripción
Abstract
Objectives: Dental pain, which is the main reason for patients consulting dentists, is classified as a public health concern. The study of cellular and molecular mechanisms contributing to pain is a fundamental element for developing new analgesics. By using a selective antagonist in an in vitro model, this study aimed to establish the role of TRPV-1 in human odontoblast-like cells (OLCs) as a therapeutic target for dental pain mediated by noxious thermal and osmotic stimuli. Methods: OLCs were differentiated from dental pulp mesenchymal cells and TRPV1 expression was evaluated. Activation of TRPV-1 was determined by evaluating changes in calcium concentration after stimulation with mannitol and xylitol hyperosmotic solutions or DMEM heated at 45 °C, using the fluorescent calcium probe Fluo-4 AM. In addition, changes in fluorescence (F/F0) due to calcium flux were evaluated using fluorometry and flow cytometry. Simultaneously, the cells were co-stimulated with the selective antagonist capsazepine (CZP). Results: OLCs expressed DSPP and DMP-1, confirming their cellular phenotype. TRPV1 was expressed, and its activation by different stimuli produced an increase in cytosolic Ca2+ which was reduced by the antagonist. Both methods used to evaluate TRPV1 activation through the measurement of calcium probe fluorescence showed similar patterns. Conclusions: These results suggest that TRPV-1 modulation using an antagonist can be implemented as a pharmacological strategy for managing dental pain mediated by hyperosmotic and thermal stimuli.
Palabras clave
Dolor dental, Canales de potencial receptor transitorio, Odontoblastos, Capsaicina/análogos y derivados, Flujo de calcio
Keywords
Dental pain, Transient receptor potential channels, Odontoblasts, Capsaicin/analogs and derivatives, Calcium flux