Extracción e identificación de las enzimas PHA sintasas y ramnosiltransferasas de Pseudomonas aeruginosa PAO1 (schroeter, 1872) migula, 1900 productora de pha's y ramnolípidos
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2016
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Resumen
Pseudomonas aeruginosa PAO1 sintetiza grandes cantidades de ramnolípidos con características de baja toxicidad, actividad superficial, carácter biodegradable, entre otras; permitiéndoles adaptarse a una gran variedad de demandas industriales como agronomía, biorremediación, productos farmacéuticos, cosméticos y de limpieza. De igual forma poseen la capacidad de sintetizar polihidroxialcanoatos (PHAs) que se caracterizan por ser compuestos biocompatibles y biodegradables, teniendo un amplio espectro de aplicaciones tanto en la industria como en la medicina. Para estudiar la producción de ramnolípidos y PHAs se determinó su producción mediante las pruebas de Bial, Oil Spreading, tinción con negro de Sudán y gravimetría, en medio nutritivo y medio industrial con glicerol USP obteniendo rendimientos de 0,0892g/l de RL y 0,00g/l de PHA, y 0,435g/l de RL y 27,785g/l de PHA promedio respectivamente. Seguido a esto mediante electroforesis desnaturalizante se evidenciaron las posibles bandas correspondientes a las subunidades de la ramnosiltransferasa 1 (RhlA y RhlB) en todas las bandas de ambos cultivos, contrario a lo observado en la ramnosiltransferasa 2 (Rhlc) y phaC sólo observadas en medio industrial con glicerol USP.
Descripción
Abstract
Pseudomonas aeruginosa PAO1 synthesizes large amounts of rhamnolipids with low toxicity characteristics, surface activity, biodegradability, among others; allowing them to adapt to a variety of industrial demands as agriculture, bioremediation, pharmaceuticals, cosmetics and cleaning. Similarly they possess the ability to synthesize polyhydroxyalkanoates (PHAs) that are characterized by being biocompatible and biodegradable compounds having a wide spectrum of applications in both industry and medicine. To study the production of rhamnolipid and PHAs it was determined by Bial test, Oil Spreading, Sudan black staining and gravimetry, in nutritive medium and industrial medium with glycerol USP obtaining yields 0,0892g / l RL and 0 , 00g / l of PHA, and 0,435g / l and RL 27,785g / l of PHA average respectively. Followed this by a denaturing electrophoresis was identified the bands that possible corresponding to the subunits of the rhamnosyltransferase 1 (RhlA and RHLB) in both cultures; the possible bands of rhamnosyltransferase 2 (Rhlc) and phaC were only observed in Industria medium with USP glycerol.
Palabras clave
Identificación, Enzimas PHA sintasas, Ramnosiltransferasa, Pseudomonas aeruginosa (Schroeter, 1872), Polihidroxialcanoato (PHA’S), Ramnolípidos
Keywords
Identification, PHA synthase enzymes, Rhamnosyltransferase, Polyhydroxyalkanoates (PHA'S), Ramnolipids