Diseño y validación de un método de separación para la metil-p-Benzoquinona secretada por la especie Ulomoides dermestoides usado en el tratamiento de enfermedades de tipo respiratorio, mediante cromatografía líquida de alta eficacia (CLAE) y caracterización del producto por resonancia magnética nuclear
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2022
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Resumen
La coleoterapia, es una técnica muy utilizada para el tratamiento de diferentes patologías entre las que se destacan enfermedades de tipo respiratorio, esto mediante la ingesta de una variedad de especies de coleópteros, principalmente el escarabajo Ulomoides dermestoides perteneciente a la familia Tenebrionidae, conocido popularmente como “Gorgojo de maní”. Ahora bien, según algunos estudios la actividad propia del gorgojo se atribuye a las benzoquinonas, siendo estas, sustancias producidas por el mismo como mecanismo de
defensa, las cuales aún no se han elucidado ni conocido su mecanismo de acción.
El presente trabajo de grado tiene como objetivo diseñar la validación de un método para la separación de la metil-p-benzoquinona del extracto de la especie Ulomoides dermestoides mediante cromatografía líquida de alta eficacia (CLAE), junto a la elucidación por resonancia magnética nuclear. De modo que, para el desarrollo del proyecto, se propuso extraer la metil-p-benzoquinona secretada por el Ulomoides dermestoides mediante extracción sólido-líquido utilizando etanol como solvente predilecto para la separación y el que demostró mayor afinidad con la metil-p-benzoquinona.
Posteriormente, el extracto etanólico de la especie Ulomoides dermestoides se analizó mediante CLAE, se identificó la metil-p-benzoquinona presente en el extracto etanólico gracias a que se utilizó un estándar como referencia de la metil-p-benzoquinona con una pureza del 99,7%. Seguido a lo anterior, en el extracto etanólico además de la metil-p-benzoquinona se refleja la existencia de aproximadamente 5 compuestos más presentes en dicho extracto. Después de realizar la separación por CLAE de la metil-p-benzoquinona presente en el extracto etanólico de la especie Ulomoides dermestoides se validó el método determinando precisión, robustez, linealidad, límite de detección y límite de cuantificación. De tal forma que se cuantificó 1200 ppm en el extracto etanólico, el límite de detección y de cuantificación es de 0,44 ppm y 1,30 ppm, respectivamente.
Finalmente, se realizó la elucidación del estándar de metil-p-benzoquinona, con el objetivo de verificar que fuera netamente el producto y que no existieran algunos otros interferentes.
Descripción
Abstract
Coleotherapy is a widely used technique for the treatment of different pathologies, among which respiratory diseases stand out, this by ingesting a variety of beetle species, mainly the Ulomoides dermestoides beetle belonging to the Tenebrionidae family, popularly known as “Peanut weevil”. However, according to some studies, the activity of the weevil is attributed to benzoquinones, these being substances produced by it as a defense mechanism, whose
mechanism of action has not yet been elucidated or known.
The objective of this degree work is to design the validation of a method for the separation of methyl-p-benzoquinone from the extract of the species Ulomoides dermestoides by means of high performance liquid chromatography (CLAE), together with nuclear magnetic resonance elucidation. So, for the development of the project, the methyl-p-benzoquinone secreted by Ulomoides dermestoides will be extracted by solid-liquid extraction using ethanol as the preferred solvent for separation and the one that will break the greatest affinity with
methyl-p-benzoquinone.
Subsequently, the ethanolic extract of the species Ulomoides dermestoides was analyzed by CLAE, the methyl-p-benzoquinone present in the ethanolic extract was identified thanks to the fact that a standard was changed as a reference of methyl-p-benzoquinone with a purity of 99,7%. Following the above, in the ethanolic extract, in addition to methyl-p-benzoquinone, the existence of approximately 5 more compounds present in said extract is reflected. After performing the separation by CLAE of the methyl-p-benzoquinone present in the ethanolic
extract of the Ulomoides dermestoides species, the method was validated by determining precision, robustness, linearity, detection limit and quantification limit. In such a way that 1200 ppm was quantified in the ethanolic extract, the detection and quantification limit is 0.44 ppm and 1.30 ppm, respectively. Finally, the elucidation of the methyl-p-benzoquinone standard was carried out, with the aim of verifying that it was clearly the product and that there were no other interfering agents.
Palabras clave
Validación, Ulomoides Dermestoides, CLAE, RMNH
Keywords
Validation, Ulomoides Dermestoides, HPLC, RMNH