Comparación de la expresión de RANKL y OPG en adolescentes y adultos tratados  con ortodoncia correctiva-estudio piloto

Bohada Martinez, Maria Camila; Del Castillo Casas, Maria Camila

Comparación de la expresión de RANKL y OPG en adolescentes y adultos tratados con ortodoncia correctiva-estudio piloto

dc.contributor.advisor	Escobar Marquez, Lina Maria
dc.contributor.advisor	Martinez Saab, Erika
dc.contributor.advisor	Mora Diaz, Ingrid Isabel
dc.contributor.author	Bohada Martinez, Maria Camila
dc.contributor.author	Del Castillo Casas, Maria Camila
dc.date.accessioned	2024-08-15T02:30:31Z
dc.date.available	2024-08-15T02:30:31Z
dc.date.issued	2024-07
dc.description.abstract	Antecedentes: dos marcadores importantes en el metabolismo óseo son el activador del receptor para el ligando del factor nuclear k b (RANKL) y la osteoprotegerina (OPG). Algunos estudios sugieren que la edad conduce a una expresión diferencial de estos marcadores. Es importante determinar si la edad influye significativamente en el proceso de remodelación, inflamación y velocidad de movimiento dental. Pocos estudios han evaluado la edad de los pacientes como una variable que puede influir en la inducción y modulación del proceso inflamatorio inducido por carga mecánica, así como en la velocidad de movimiento alcanzada en estos pacientes durante fases del tratamiento de ortodoncia, como alineación, nivelación. y retracción canina. por esto, se necesitan más estudios para comprender mejor el papel del sistema OPG/RANKL en la remodelación ósea durante el movimiento dental ortodóntico en pacientes de diferentes edades y fases de tratamiento. Objetivo: Comparar los niveles de expresión de RANKL y OPG en una muestra piloto de pacientes adultos y adolescentes con tratamiento de ortodoncia. Métodos: Para estandarizar el método, se siguieron criterios de inclusión y exclusión, se analizaron cinco pacientes entre 14 y 40 años. Se tomaron muestras de fluido crevicular gingival (FCG) de la zona distal del canino superior derecho, siguiendo el protocolo establecido por Rody et al., 2014. La extracción de ARN se realizó a partir de las muestras de FCG utilizando el kit quick-RNA, según las instrucciones del fabricante. Se cuantificó el ARN obtenido y s evaluó su calidad mediante espectrofotometría. El ADNc se obtuvo mediante transcripción inversa utilizando el protocolo del kit de síntesis de ADNc de primera hebra protoscript II. La técnica (RT-PCR) se realizó utilizando el kit luna universal para determinar niveles de expresión de RANKL y OPG. La amplificación y eficiencia se analizaron utilizando el programa de PCR Linreg. Se realizaron lecturas correspondientes a RANKL y OPG de forma individual para determinar el nivel de expresión en las muestras. Como control de expresión se analizó el gen GAPDH. Resultados: Inicialmente se estandarizó la forma más adecuada y eficiente de obtener una muestra para amplificación por PCR a partir del FCG recolectado. Método 1: extracción de ARN+RT+PCR. Para obtener ARN puro de mejor calidad, se utilizó el método 1. El ARN obtenido se cuantificó y analizó su calidad y pureza mediante la evaluación de las curvas de espectrofotometría. Se logró una amplificación adecuada de genes RANKL y OPG en 5 individuos bajo tratamiento de ortodoncia. La expresión de RANKL aumentó en t1 en comparación con t0; Se observó un aumento significativo de OPG en t1. Conclusiones: Es importante realizar un control de la placa antes de tomar la muestra. Las cantidades de muestra obtenidas fueron suficientes para analizar la amplificación de RANKL y OPG. La extracción de ARN se estandarizó mediante el método 1 porque permitió obtener mayor cantidad de ARN, con calidad suficiente para realizar la PCR.
dc.description.abstractenglish	Background: Two important metabolism markers are nuclear factor k B (RANKL) and osteoprotegerin (OPG), some studies suggest age may lead to different expressions, however few have studies have assessed patient age as a variable as well as movement pace such as alignment, leveling and canine retraction during orthodontic treatment. Objective: to compare RANKL and OPG levels in a pilot sample of adult and adolescent patients with orthodontic treatment. Methods: Five patients between 14 and 40 years of age were assessed, gingival crevicular fluid (GCF) samples were taken from the right upper canine distal area as per Rody et al., in 2014. RNA samples were taken from GCF with Quick-RNA, quantified and quality measured with spectrophotometry. DNAc was obtained by reverse transcription with first strand ProtoScript II, the technique (RT-PCR) was performed with Luna Universal in order to determine the RANKL and OPG expressions. Amplification and efficiency were analysed with PCR Linreg, individual readings of RANKL and OPG were taken in order to determine expression and control was with GAPDH gene. Results: Standardisation for samples was by method 1 extraction of RNA+RT+PCR. This RNA was quantified and analysed with spectrophotometry curves. Adequate amplification of RANKL and OPG from five individuals were obtained, RANKL increased in T1 compared to T0 and OPG increased in T1. Conclusions: A plaque control is important before taking a sample and sample quantities were enough for RANKL and OPG analysis. RNA extraction was standardized with method 1 allowing more quantity in order to test with PCR.
dc.description.degreelevel	Especialización	spa
dc.description.degreename	Especialista en Ortodoncia	spa
dc.description.sponsorship	Grupo de Investigación UMIMC - Unidad de Manejo Integral de Malformaciones Craneofaciales
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.identifier.instname	instname:Universidad El Bosque	spa
dc.identifier.reponame	reponame:Repositorio Institucional Universidad El Bosque	spa
dc.identifier.repourl	repourl:https://repositorio.unbosque.edu.co
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/20.500.12495/12879
dc.language.iso	es
dc.publisher.faculty	Facultad de Odontología	spa
dc.publisher.grantor	Universidad El Bosque	spa
dc.publisher.program	Especialización en Ortodoncia	spa
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dc.rights	Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional
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dc.rights.local	Acceso abierto	spa
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
dc.subject	Adolescentes
dc.subject	Adultos
dc.subject	RANKL
dc.subject	OPG
dc.subject	Ortodoncia
dc.subject	Fluido crevicular
dc.subject.keywords	Adolescents
dc.subject.keywords	Adults
dc.subject.keywords	RANKL
dc.subject.keywords	OPG
dc.subject.keywords	Orthodontics
dc.subject.keywords	Crevicular fluid
dc.subject.nlm	WU400
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dc.title.translated	Comparison of RANKL and OPG expression in adolescents and adults with corrective orthodontics-pilot study
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