Validación de un método de separación y cuantificación de flavonoides totales expresados como Quercetina en la cáscara de mango Tommy Atkins “Mangifera Indica. L” de Cundinamarca, Colombia mediante Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia con detector UV-VIS
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2023
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Resumen
En Colombia el fruto “Mangifera Indica. L” , más conocido como Mango de la variedad “Tommy Atkins", es ampliamente cultivado gracias a la diversidad de zonas topográficas del país. En la actualidad se ha evidenciado que la cáscara de esta fruta es un desecho común del que se desconoce la presencia de compuestos bioactivos como los flavonoides, los cuales presentan propiedades antioxidantes y antibacterianas que le brindan un potencial terapéutico importante. Según lo anterior, en el presente trabajo se busca obtener un extracto hidroalcohólico de la cáscara del mango Tommy al ser una de las especies de mango más comercial en el país, con el fin de realizar una validación del método de separación y cuantificación de los flavonoides totales expresados como quercetina presentes en la cáscara, mediante cromatografía líquida de alta eficiencia con detector UV-VIS estableciendo las condiciones óptimas de separación. Se plantea por tanto en este trabajo una extracción de compuestos fenólicos de la cáscara de mango Tommy por medio de sonda ultrasónica con agua y diferentes proporciones de etanol como disolventes, para luego recuperar el sobrenadante como un extracto hidroalcohólico de diferentes concentraciones. Por el método Folin-Ciocalteu se determinó que el extracto hidroalcohólico al 53% presenta una mayor concentración de compuestos fenólicos frente a los demás extractos realizados y por tanto este extracto al 53% de etanol es empleado en la validación del método de separación y cuantificación de flavonoides totales expresados como quercetina por cromatografía líquida de alta eficiencia con detector UV-VIS. Posteriormente se determinan las condiciones cromatográficas óptimas para la separación y cuantificación con una columna C18, temperatura de 20°C, flujo isocrático de 0,5 mL/ min, volumen de inyección de 5 μL, longitud de onda de 370 nm, una fase móvil de acetonitrilo y agua en proporción 33:67 obteniendo una excelente separación del pico de interés que permite reconocer los flavonoides totales expresados como quercetina. Se determinan los parámetros de la validación por adición estándar obteniendo un método preciso, lineal, exacto, reproducible, con límite de detección de 1,8789 ppm y límite de cuantificación de 5,6935 ppm llegando a una concentración de flavonoides totales expresados como quercetina de 54,18 ppm en el extracto hidroalcohólico de la cáscara de Mango Tommy.
Descripción
Abstract
In Colombia the fruit "Mangifera Indica. L" or better known as Mango of the "Tommy Atkins" variety, is widely cultivated thanks to the diversity of topographic zones of the country. At present, it has become evident that the peel of this fruit is a common waste from which the presence of bioactive compounds such as flavonoids is unknown, and have antioxidant and antibacterial properties that give it an important therapeutic potential. According to the above, the present work seeks to obtain a hydroalcoholic extract from the peel of the Tommy mango, being one of the most commercial mango species in the country, in order to validate the method of separation and quantification of total flavonoids expressed as quercetin present in the peel, by means of high performance liquid chromatography with UV-VIS detector, establishing the optimal conditions for separation. Therefore, this work proposes an extraction of phenolic compounds from Tommy mango peel by means of an ultrasonic probe with water and different proportions of ethanol as solvents, and then recovering the supernatant as a hydroalcoholic extract of different concentrations. By the Folin-Ciocalteu method, it was determined that the hydroalcoholic extract at 53% presents a higher concentration of phenolic compounds compared to the other extracts made and therefore this extract at 53% ethanol is used in the validation of the method of separation and quantification of total flavonoids expressed as quercetin by high-performance liquid chromatography with UV-VIS detector. Subsequently, the optimal chromatographic conditions for the separation and quantification are determined with a C18 column, temperature of 20°C, isocratic flow of 0.5 mL/ min, injection volume of 5 μL, wavelength of 370 nm, a mobile phase of acetonitrile and water in 33:67 ratio obtaining an excellent separation of the peak of interest that allows the recognition of total flavonoids expressed as quercetin. The validation parameters were determined by standard addition, obtaining a precise, linear, accurate, reproducible method, with a detection limit of 1.8789 ppm and a quantification limit of 5.6935 ppm, reaching a concentration of total flavonoids expressed as quercetin of 54.18 ppm in the hydroalcoholic extract of Mango Tommy peel.
Palabras clave
Tommy Atkins, Mangifera Indica. L, Flavonoides, Validación, Cromatografía líquida de alta eficiencia, Quercetina
Keywords
Tommy Atkins, Mangifera Indica. L., Flavonoids, Validation, Liquid chromatography of high efficiency, Quercetin