Frecuencia del virus de papiloma humano en el epitelio de surcos y bolsas periodontales en diferentes estadios de la enfermedad periodontal. Estudio piloto
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2020
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Resumen
Objetivo: Establecer la frecuencia de detección del virus del papiloma humano (VPH) en tejido periodontal en una muestra de pacientes con diferentes condiciones periodontales. Materiales y Métodos: Este estudio piloto incluyo 45 sujetos, mayores de 18 años y menores de 65 años asignados de acuerdo con la edad y el estado periodontal; menores de 40 años (n=19); salud gingival y/o gingivitis (n=8), periodontitis estadio I o II (n=5) y estadio III o IV (n=6) y mayores de 40 años (n=26); salud gingival y/o gingivitis (n=8); periodontitis estadio I o II (n=5); estadio III o IV (n=13). Todos los sujetos firmaron el consentimiento informado aprobado por el comité de ética de la Universidad El Bosque. Se tomaron muestras del surco gingival o de las bolsas periodontales usando puntas de papel estériles, en el cuadrante de las bolsas más profundas realizando fricción sobre el epitelio sulcular. El ADN total se extrajo usando el kit QIAamp® DNA FFPE Tissue y se realizó una PCR con PCO3/PCO4, que amplifican un fragmento de 110 pb del gen de la ßglobina, visualizado por electroforesis en gel de agarosa al 1% teñido con SYBR Safe para identificar la banda amplificada de 110pb. Una qRT-PCR se realizó para la detección de VPH en muestras usando cebadores de consenso GP5+/GP6+ con el kit de mezcla maestra Kappa SYBR Green (KapaBiosystems®) y CFX96 Ciclador térmico en tiempo real Bio-Rad (Biorad, Hercules, CA). La frecuencia se estableció por la presencia o ausencia de VPH y VPH 16/18.Resultados: El total de las 45 muestras tomadas, 4 muestras fueron positivas para VPH, un paciente en el grupo de salud periodontal de 45 años de edad hombre, un paciente en el grupo de estadio I de 35 años de edad mujer, un paciente en el grupo de estadio III de 35 años de edad hombre y uno en el grupo de estadio IV de 47 años de edad mujer. Conclusión: Se observó una frecuencia de VPH del 8.8% de las muestras de células epiteliales de tejido periodontal. La presencia de VPH no se asoció con el estadio periodontal o la edad. El tejido periodontal puede ser un reservorio de VPH. Los resultados de la curva no demostraron la presencia de VPH 16 o 18. Futuros análisis deberán llevarse a cabo para establecer los genotipos virales presentes en las muestras.
Descripción
Abstract
Objective: To establish the frequency of detection of the human papillomavirus (HPV) on periodontal tissue within a sample of patients with differing periodontal conditions. Materials and methods: This pilot study included 45 subjects under 65 years of age and over 18 years of age, assigned depending on the age and periodontal stage: under 40 years (n=19); gingival health or gingivitis (n=8), periodontitis stage I or II (n=5), stage III or IV (n=6) and over 40 years (n=26); gingival health or gingivitis (n=8); periodontitis stage I or II (n=5), stage III or IV (n=13). All subjects signed the informed consent approved by the ethics committee of Universidad El Bosque. Crevicular sulcus or periodontal pocket samples were taken from the deepest quadrant using sterile paper tips with friction. Total DNA was extracted using the QIAamp® DNA FFPE Tissue kit and a PCR was carried out with PCO3/PCO4 which amplifiy a segment of 110 pb ßglobina gene visualised by electrophoresis in agarose gel at 1%, dyed with SYBR Safe in order to identify the amplified band. A qRT-PCR was carried out in oder to detec the HPV from samples using GP5+/GP6+ primers, the Kappa SYBR Green master mix (KapaBiosystems®) and CFX96 thermal cycler in real-time Bio-Rad (Biorad, Hercules, CA). Frequency was established by the presence or absence of HPV and HPV 16/18. Results: Four samples from the 45 taken resulted positive: one male patient 45 years of age in the periodontal group, one female patient 35 years of age and stage I, one male patient aged 35 years and stage III and one female aged 47 stage IV. Conclusion: A HPV frequency of 8.8% was observed on the epithelial cell samples from periodontal tissue. Presence of HPV was not associated with periodontal condition or age. Periodontal tissue may be a reservoir for HPV. Curve results did not show presence of HPV 16 or 18. Future analysis should be carried out in order to establish the viral genotypes present in the samples.
Palabras clave
VPH, Tejido periodontal, Surco gingival, Bolsa periodontal, Gingivitis, Periodontitis
Keywords
HPV, Periodontal tissue, Crevicular sulcus, Periodontal pocket, Gingivitis, Periodontitis