Efecto de la vitamina D y la vitamina E en la diferenciación de células mesenquimales in vitro

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2021-08-12

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Resumen

El objetivo del presente estudio fue determinar los efectos de la vitamina D y E en la proliferación, morfología y diferenciación de las células madre de pulpa dental humana (hDPSC). Métodos: En este estudio experimental in vitro, se aislaron, caracterizaron y trataron hDPSC con vitaminas D y E, individualmente y en combinación, utilizando diferentes dosis y períodos de tratamiento. Los cambios en la morfología y la proliferación celular se evaluaron mediante microscopía óptica y ensayo de resazurina, respectivamente. La diferenciación de osteoblastos se evaluó con tinción con rojo de alizarina S y expresión de genes RUNX2, Osterix y Osteocalcina usando RT-PCR en tiempo real. Resultados: En comparación con las células no tratadas, el número de células se redujo significativamente después del tratamiento con vitamina D (49%), vitamina E (35%) y vitaminas D + E (61%) después de 144 h. En comparación con los cultivos celulares tratados con vitaminas individuales, las células tratadas con vitaminas D + E demostraron una menor confluencia celular, con un citoplasma más extenso y plano que inició la formación de un número significativamente mayor de nódulos calcificados después de 7 días de tratamiento. Después de 14 días, el tratamiento con vitaminas D, E y D + E aumentó la transcripción de los genes RUNX2, Osterix y Osteocalcina. Conclusiones: Las vitaminas D y E indujeron la diferenciación osteoblástica de las hDPSC, como lo demuestra la disminución de la proliferación celular, los cambios morfológicos y la formación de nódulos calcificados, aumentando la expresión de genes de diferenciación. El tratamiento concurrente con vitaminas D + E induce un efecto sinérgico en la diferenciación hacia un linaje osteoblástico.

Descripción

Abstract

The aim of the present study was to determine the effects of vitamins D and E on the proliferation, morphology, and differentiation of human dental pulp stem cells (hDPSCs). Methods: In this in vitro experimental study, hDPSCs were isolated, characterized, and treated with vitamins D and E, individually and in combination, utilizing different doses and treatment periods. Changes in morphology and cell proliferation were evaluated using light microscopy and the resazurin assay, respectively. Osteoblast differentiation was evaluated with alizarin red S staining and expression of RUNX2, Osterix, and Osteocalcin genes using real-time RT-PCR. Results: Compared with untreated cells, the number of cells significantly reduced following treatment with vitamin D (49%), vitamin E (35%), and vitamins D + E (61%) after 144 h of treatment. Compared with cell cultures treated with individual vitamins, cells treated with vitamins D + E demonstrated decreased cell confluence, with more extensive and flatter cytoplasm that initiated the formation of a significantly large number of calcified nodules after 7 days of treatment. After 14 days, treatment with vitamins D, E, and D + E increased the transcription of RUNX2, Osterix, and Osteocalcin genes. Conclusions Vitamins D and E induced osteoblastic differentiation of hDPSCs, as evidenced by the decrease in cell proliferation, morphological changes, and the formation of calcified nodules, increasing the expression of differentiation genes. Concurrent treatment with vitamins D + E induces a synergistic effect in differentiation toward an osteoblastic lineage.

Palabras clave

Vitamina D, Vitamina E, Células madre, Proliferación celular, Movimiento dental

Keywords

Vitamin D, Vitamin E, Stem Cells, Cellular proliferation, Dental movement

Temáticas

Enfermedades periodontales
Ortodoncia
Receptores de calcitriol

Citación