Anticuerpos policlonales contra la proteína recombinante NS3 del virus del dengue

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dc.contributor.authorCastellanos, Jaime
dc.contributor.authorMorales, Liliana
dc.contributor.authorVelandia-Romero, Myriam Lucía
dc.contributor.authorCalderón-Peláez, María Angélica
dc.contributor.authorChaparro-Olaya, Jacqueline
dc.contributor.orcidCastellanos, Jaime [0000-0003-1596-8383]
dc.contributor.orcidVelandia-Romero, Myriam Lucía [0000-0002-3340-7304]
dc.contributor.orcidChaparro-Olaya, Jacqueline [0000-0001-9815-3459]
dc.date.accessioned2019-07-03T17:04:59Z
dc.date.available2019-07-03T17:04:59Z
dc.date.issued2017
dc.description.abstractIntroducción. El dengue es una enfermedad causada por uno de los cuatro serotipos del virus del dengue (DENV) y es endémica en, aproximadamente, 130 países. Su incidencia ha aumentado notablemente en las últimas décadas, así como la frecuencia y la magnitud de los brotes. A pesar de los esfuerzos, no existen tratamientos profilácticos ni terapéuticos contra la enfermedad y, en ese contexto, el estudio de los procesos que gobiernan el ciclo de infección del DENV es esencial para desarrollar vacunas o terapias antivirales. Una de las moléculas del DENV más prometedoras es la proteína no estructural 3 (NS3), la cual es indispensable para la replicación viral y es uno de los principales blancos inmunológicos durante la infección. Objetivo. Producir anticuerpos policlonales para contribuir a los futuros estudios sobre las interacciones entre la proteína NS3 y otras proteínas celulares. Materiales y métodos. Se expresaron dos proteínas recombinantes del dominio helicasa de NS3 del DENV de serotipo 2, las cuales se emplearon para inmunizar ratas y producir anticuerpos policlonales. Resultados. Los anticuerpos producidos fueron útiles en ensayos de Western blot e inmunofluorescencia y se reportó por primera vez un anticuerpo policlonal anti-NS3 que permitió la inmunoprecipitación de la proteína viral y la detecta con Western blot sin necesidad de inducir sobreexpresión de NS3 o de usar extractos de células marcados metabólicamente con radioisótopos. Conclusión. Las proteínas recombinantes expresadas y los anticuerpos producidos constituyen herramientas valiosas para estudiar procesos infecciosos del DENV que involucren a la proteína NS3 y evaluar pruebas dirigidas a interferir las funciones de esta proteína.spa
dc.description.abstractenglishIntroduction: Dengue is a disease caused by one of four serotypes of the dengue virus (DENV) and is endemic in approximately 130 countries. The incidence of dengue has increased dramatically in recent decades, as well as the frequency and magnitude of outbreaks. Despite all efforts, there are no prophylactic or therapeutic treatments for the disease. Accordingly, research on the processes governing the DENV infection cycle is essential to develop vaccines or antiviral therapies. One of the most attractive DENV molecules to investigate is nonstructural protein 3 (NS3), which is essential for viral replication and a major immune target for infection. Objective: To produce antibodies to support future studies on NS3 and its cellular interactions with other proteins. Materials and methods: Two recombinant proteins of the helicase domain of DENV NS3 serotype 2 were expressed, and used to immunize mice and produce polyclonal antibodies. Results: The antibodies produced were useful in Western blot and immunofluorescence tests. We report an NS3 antibody that immunoprecipitates the viral protein and detects it in Western blot with no need to over-express it or use cell extracts with metabolic radiolabeling.eng
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.doihttps://doi.org/10.7705/biomedica.v37i1.3249
dc.identifier.instnameinstname:Universidad El Bosquespa
dc.identifier.issn0120-4157
dc.identifier.reponamereponame:Repositorio Institucional Universidad El Bosquespa
dc.identifier.repourlrepourl:https://repositorio.unbosque.edu.co
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12495/1482
dc.language.isospa
dc.publisherInstituto Nacional de Saludspa
dc.publisher.journalBiomédica : Revista del Instituto Nacional de Saludspa
dc.relation.ispartofseriesBiomédica : Revista del Instituto Nacional de Salud, 0120-4157, Vol.37, Nro.1, 2017, p. 131-140spa
dc.relation.urihttps://doi.org/10.7705/biomedica.v37i1.3249
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.accessrightshttps://purl.org/coar/access_right/c_abf71
dc.rights.creativecommons2017
dc.rights.localAcceso cerradospa
dc.subjectVirus del denguespa
dc.subjectProteínas recombinantesspa
dc.subjectInmunoprecipitaciónspa
dc.subjectProducción de anticuerposspa
dc.subject.decsDenguespa
dc.subject.decsInfecciones por virus ARNspa
dc.subject.decsFormación de anticuerposspa
dc.subject.keywordsDengue virusspa
dc.subject.keywordsRecombinant proteinspa
dc.subject.keywordsImmunofluorescencespa
dc.subject.keywordsImmunoprecipitationspa
dc.subject.keywordsAntibody productionspa
dc.titleAnticuerpos policlonales contra la proteína recombinante NS3 del virus del denguespa
dc.title.translatedPolyclonal antibodies against recombinant dengue virus NS3 protein
dc.typearticlespa
dc.type.hasversioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.localartículospa

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