Evaluación microbiológica de cepillos contaminados por Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 y Klebsiella oxytoca ATCC 43086
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2022
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Resumen
Los cepillos dentales son herramientas de higiene personal que pueden jugar un papel importante en la transmisión de enfermedades y aumentar el riesgo de infección por microorganismos potencialmente patógenos. En las cerdas de los cepillos dentales se han encontrado bacilos entéricos como Klebsiella pneumoniae y Klebsiella oxytoca con una prevalencia del 21% y 24,7%, respectivamente, siendo estos patógenos para el organismo humano debido a los múltiples factores de virulencia relacionados con procesos infecciosos localizados y sistémicos. Actualmente se han estudiado diferentes métodos y sustancias para la desinfección de cepillos dentales, como el uso de clorhexidina al 0,2%, enjuagues bucales, aceites esenciales, hipoclorito de sodio, luz ultravioleta, alcohol, entre otros. Sin embargo, ninguno ha demostrado ser eficiente y efectivo para eliminar estas dos bacterias. Objetivo: Evaluar la eficacia de los agentes antimicrobianos, clorhexidina 0,2%, HOCl 0,2%, nano partículas de plata (Nanosilver) 0,1% y luz UV como desinfectantes de cepillos dentales en la eliminación de K. pneumoniae ATCC 700603 y K. oxytoca ATCC 43086. Métodos: Estudio experimental In vitro. 14 cepillos de dientes (Colgate®) fueron contaminados con K. pneumoniae ATCC700603 (1x108 UFC/mL) y 14 cepillos de dientes (Colgate®) con K. oxytoca ATCC43086. Se evaluaron tres métodos de desinfección: inmersión, aspersión e irradiación con luz ultravioleta (UV) (Violife/Zapi-Luxe-UV-Sanitizer). La inmersión y aspersión se realizó con ácido hipocloroso (HOCl) 0,2% pH5,8 y Nanosilver 0,1%. Se utilizó cloruro de sodio (NaCl) al 0,9% como control negativo y CHX (0,2%) como control positivo. Los recuentos se realizaron en agar soja tripticasa y se incubaron a 37°C durante 24 horas. Después de la incubación, se contaron las unidades formadoras de colonias (UFC/mL). El análisis de los datos se realizó mediante Shapiro-Wilk y una prueba de ANOVA de una vía con corrección de Bonferroni con un nivel de significancia de p≤ 0.05. Todos los análisis se realizaron utilizando el software Graphpad. Resultados: Se observó una reducción del 100% en el recuento de K. pneumoniae y K.oxytoca después de la inmersión con HOCl 0,2% y revelando diferencias estadísticamente significativas (p<0,0001) con las otras sustancias. Se encontró una reducción de 19.38% de K. pneumoniae en inmersión cuando se utilizó Nanosilver 0.1% y 12.03% para K. oxytoca. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas (p=0,0002) entre el grupo control y el conteo con Nanosilver 0,1%. Para los métodos de aspersión e irradiación se obtuvieron diferencias significativas en los desinfectantes CHX 0,2%, HOCl 0,2%, Nanosilver y NaCl 0,9%, y LUZ UV para K. pneumoniae y NaCl 0,9%, HOCl 0,2%, CHX 0,2%, Nanosilver 0.1% y LUZ UV para K oxytoca todos con un valor p<0.0001. HOCl 0,2% resultó ser el desinfectante más efectivo para eliminar estas bacterias en los métodos evaluados, seguido de CHX 0,2% y Nanosilver la sustancia menos efectiva para eliminar estas bacterias. Conclusiones: El método de inmersión y aspersión con HOCl 0,2% redujo el recuento de K. pneumoniae y K. oxytoca, siendo esta una alternativa para la desinfección de cepillos dentales. La desinfección de cepillos dentales con un producto UV comercial mostró baja eficacia.
Descripción
Abstract
Toothbrushes are personal hygiene tools which may transmit diseases and increase infection. Klebsiella pneumoniae y Klebsiella oxytoca have been found on bristles with 21 % and 24.7 % prevalence respectively and are human pathogens due to localized and systemic processes. Different methods and substance for disinfection have been evaluated, such as chlorhexidine 0.2 %, mouthwashes, essential oils, sodium hypochlorite, UV light and alcohol. However, not one has been proven to eliminate them. Objective: To evaluate the efficacy of antimicrobial agents, chlorhexidine 0.2 %, HOCI 0.2 %, silver nano particles (Nanosilver) 0.1 % and UV light as disinfectants of said bacteria. Methods: In vitroexperimental study in which 14 toothbrushes (Colgate®) were contaminated with K. pneumoniae ATCC700603 (1x10 8 UFC/mL) and other 14 (Colgate®) with K. oxytoca ATCC43086. Three disinfection methods were assessed: immersion, aspersion and UV (Violife/Zapi-Luxe-UV-Sanitizer). Immersion and aspersion were with HOCl 0.2% pH 5.8 and Nanosilver 0.1%. Sodium chloride (NaCl) 0.9 % was used as negative control and CHX 0.2% as positive control. Cultures were grown in trypticase soy agar and incubated at 37 ˚C during 24 hours. After this, the colony units were accounted for (UFC/ml), data analysis was with Shapiro-Wilk and one-way ANOVA with Bonferroni correction and a significance level of p≤ 0.05. All analyses were with Graphpad software. Results: A reduction of 100 % of K.pneumoniae and K.oxytoca after immersion in HOCI 0.2 % and revealing statistically significant differences (p (p<0.0001) with other substances. A reduction of 19.38 % of K.pneumoniae in immersion with Nanosilver 0.1 % and 12.03 % of K. oxytoca. Statistically significant differences (p=0.0002) were found between the control and count with Nanosilver 0.1 %. The disinfectants CHX 0.2%, HOCl 0.2%, Nanosilver and NaCl 0.9%, and UV for K.pneumoniae and NaCl 0.9%, HOCl 0.2%, CHX 0.2%, Nanosilver 0.1% and UV for K. oxytoca presented significant differences with aspersion and radiation, with a value of (p<0.0001). HOCl 0.2% resulted the most efficient for eliminating said bacteria in the evaluated methods, followed by CHX 0.2%; Nanosilver was the less effective. Conclusions: The immersion method with HOCI 0.2 % proved to be efficient because it reduced the K. pneumoniae and K. oxytoca. A commercial UV product did not perform well.
Palabras clave
Evaluación microbiológica, Cepillos dentales, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Agentes antimicrobianos
Keywords
Microbiological evaluation, Toothbrushes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Antimicrobial agents