Evaluación in vitro del perfil de citocinas inducido por Streptococcus oralis y Streptococcus sanguinis en células dendríticas condicionadas por fibroblastos gingivales
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2022
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Resumen
Antecedentes: La cavidad oral está habitada por más de 700 especies bacterias que hacen parte de la microbiota oral, y los Streptococcus son las especies más abundantes en condiciones de salud. El mantenimiento de la homeostasis es indispensable para mantener la salud periodontal, y este proceso depende de la interacción entre la microbiota y el sistema inmune del huésped. Las células dendríticas son claves en la coordinación de las respuestas pro o anti-inflamatorias, las cuales dependen tanto de las células estromales, como de las diferentes señales que censan a través de sus receptores, que en la mucosa oral provienen en gran parte de microbiota. Objetivo: Evaluar el perfil de citocinas inducido por S. oralis y S. sanguinis en MonDCs condicionadas con medios de fibroblastos gingivales. Métodos: Se condicionaron MonDCs con sobrenadantes de fibroblastos gingivales humanos sanos por 4 horas y se estimularon por 24 horas con inóculos mixtos de S. oralis y S. sanguinis a MOIs 2.5 y 5.0. Se tomaron los sobrenadantes de los cultivos y se evaluaron los niveles de citocinas solubles por citometría de flujo. Células no condicionadas, y células sin estímulo se tomaron como control; células estimuladas con LPS de E. coli como control de maduración. Los datos se analizaron mediante ANOVA no paramétrico. Resultados: En las células condicionadas con los sobrenadantes de FGH y estimuladas con los inóculos mixtos de Streptococcus se observaron tendencias de menores niveles de las citocinas pro-inflamatorias como TNFα (p=0.0723) en los diferentes estímulos respecto a las no condicionadas. Así mismo, en las células condicionadas hubo una tendencia marcada a producir mayores niveles de las citocinas anti-inflamatorias TGF-β (p=0.0865) e IL-10 a ambos MOI de estímulo, respecto a las células no condicionadas. Conclusiones: Los resultados sugieren que los sobrenadantes de los FGH inducen una menor respuesta inflamatoria en las MonDCs estimuladas con los inóculos mixtos de S. oralis y S. sanguinis. Por lo cual el condicionamiento por parte de células estromales a MonDCs tiene un papel importante en la inmunomodulación a bacterias comensales de la cavidad oral.
Descripción
Abstract
Background: The oral cavity is inhabited by more than 700 bacterial species that are part of the oral microbiota, and Streptococcus are the most abundant species in healthy conditions. The maintenance of homeostasis is essential to maintain periodontal health, and this process depends on the interaction between the microbiota and the host's immune system. Dendritic cells are key in coordinating pro- or anti-inflammatory responses, which depend both on stromal cells and on the different signals detected through their receptors, which in the oral mucosa largely come from the microbiota. Objective: To evaluate the cytokine profile induced by S. oralis and S. sanguinis in MonDCs conditioned with gingival fibroblast media. Materials and methods: MonDCs were conditioned with supernatants of healthy human gingival fibroblasts for 4 hours and stimulated for 24 hours with mixed inocula of S. oralis and S. sanguinis at MOIs 2.5 and 5.0. Culture supernatants were taken, and soluble cytokine levels were assessed by flow cytometry. Unconditioned cells and cells without stimulus were taken as control; cells stimulated with E. coli LPS as a maturation control. Data were analyzed by non-parametric ANOVA. Results: In the cells conditioned with the HGF supernatants and stimulated with the mixed Streptococcus inoculums, trends of lower levels of proinflammatory cytokines such as TNFα (p=0.0723) were observed in the different stimuli compared to those not conditioned. Likewise, in the conditioned cells there was a marked tendency to produce higher levels of the anti-inflammatory cytokines TGF-β (p=0.0865) and IL-10 at both stimulus MOI, compared to the unconditioned cells. Conclusions: The results suggest that HGF supernatants induce a lower inflammatory response in MonDC stimulated with mixed inocula of S. oralis and S. sanguinis. Therefore, conditioning by stromal cells to MonDCs has an important role in the immunomodulation of commensal bacteria in the oral cavity.
Palabras clave
Célula dendrítica, Inmunomodulación, Streptococcus, Fibroblasto, Citocinas
Keywords
Dendritic cell, Immunomodulation, Streptococcus, Fibroblast, Cytokines