Propiedades pro inflamatorias de lipopolisacárido de Eikenella corrodens y su capacidad para inducir disfunción endotelial
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2014
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Resumen
Eikenella corrodens es un bacilo anaerobio facultativo Gram negativo que hace parte de la flora oral y del tracto respiratorio superior humano. En la cavidad oral, aumenta su prevalencia cuando se asocia a la enfermedad periodontal, y a nivel sistémico se asocia a bacteriemias y endocarditis infecciosas. La periodontitis es una enfermedad multifactorial asociada a un componente poli bacteriano predominantemente Gram negativo en donde la respuesta inflamatoria conlleva a la perdida de los tejidos de soporte del diente y finalmente la perdida dental. Se ha reportado que existe el paso de bacterias periodontales o de sus componentes a circulación desde lesiones periodontales, en donde el sistema inmune del hospedero reconoce al lipopolisacárido (LPS) y se inducen respuestas inflamatorias sistémicas importantes. Estudios in vitro han demostrado que LPS de Porphyromonas gingivalis induce activación de células endoteliales y macrófagos, expresión de moléculas de adhesión en células endoteliales y formación de células espumosas; eventos que contribuirían al desarrollo de aterosclerosis. Así mismo se han encontrado componentes de otros periodontopatógenos como E. corrodens en lesiones ateromatosas y aún se desconocen sus implicaciones en el riesgo cardiovascular. Es por esta razón que este trabajo pretende determinar la capacidad del lipopolisacárido de Eikenella corrodens ATCC (23834) de inducir respuesta pro-inflamatoria en células endoteliales de arteria coronaria humana (HCAEC) y en monocitos humanos (THP-1) in vitro. Para esto se evaluaron los niveles de mRNA y proteína soluble de las citocinas pro-inflamatorias IL-6 y TNF-α y el quimiocina IL-8, mediante qPCR y citometría de flujo. Además se evaluó la expresión de moléculas de adhesión ICAM-1 y PECAM-1 y de receptores toll like (TLR2, TLR4) en células endoteliales mediante cell-ELISA. LPS de E. corrodens ATCC (23834) a diferentes concentraciones (1000 y 100 ng/mL) indujo un perfil de respuesta inflamatoria en células HCAEC y THP-1. En células HCAEC indujo un aumento en la expresión de TLR-2 y TLR4, citocinas pro-inflamatorias (IL-6, IL – 8 y TNF-α) y moléculas de adhesión (ICAM-1 y PECAM-1), mientras que en células THP-1 se presentó aumento en la expresión de citocinas pro inflamatorias (IL-6, IL – 8 y TNF-α) aunque no se encontró aumento en la expresión de TLR-2 y TLR4 en esta línea celular. Estos resultados sugieren que el LPS de E. corrodens al igual que el LPS de P. gingivalis está participando activamente en inducir una respuesta pro-inflamatoria que promueve procesos que desencadenan disfunción endotelial relacionada con aterosclerosis.
Descripción
Abstract
Eikenella corrodens is a facultative anaerobic Gram-negative bacillus that is part of the normal oral flora and the human upper respiratory tract. In the oral cavity, its prevalence increases when associated with periodontal disease, and is associated with systemic bacteremia and infectious endocarditis. Periodontitis is a multifactorial disease associated with a poly predominantly Gram negative bacterial component in the inflammatory response which leads to the loss of the support tissues of the teeth and eventually tooth loss. It has been reported that there is passage of periodontal bacteria or their components to circulatory system from periodontal lesions, where the immune system of the host is exposed to lipopolysaccharide (LPS) and systemic responses are induced. In vitro studies have shown that some types of LPS (Porphyromonas gingivalis) induced activation of endothelial cells and macrophages, expression of adhesion molecules on endothelial cells and formation of foam cells; events that contribute to the development of atherosclerosis. Likewise other periodontopathogens components like LPS and DNA (as E. corrodens) has been found in atheromatous lesions and their implications are not yet known cardiovascular risk. Because of this reason, this paper seeks to determine the ability of Eikenella corrodens ATCC (23834) lipopolysaccharide to induce pro-inflammatory response in endothelial cells (HCAEC) and monocytes (THP-1) in vitro. The results showed that E. corrodens ATCC (23834) LPS at different concentrations (1000 and 100 ng / ml) induces an inflammatory response profile in HCAEC and THP-1 cells. In HCAEC cells induces increased expression of TLR-2 and TLR4, pro-inflammatory cytokines (IL-6, IL - 8 and TNF-α) and adhesion molecules (ICAM-1 and PECAM-1), whereas in THP -1 induces increased expression of pro-inflammatory cytokines (IL-6, IL - 8 and TNF-α) but not increased expression of TLR-2 and TLR4. These results suggest that E. corrodens LPS as the LPS from P. gingivalis is actively involved in inducing a pro-inflammatory response that promotes processes that trigger endothelial dysfunction associated with atherosclerosis.
Palabras clave
Propiedades pro inflamatorias, Lipopolisacárido, Eikenella corrodens, Disfunción endotelial
Keywords
Pro-inflammatory properties, Lipopolysaccharide, Eikenella corrodens, Endothelial dysfunction