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https://hdl.handle.net/20.500.12495/49

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Examinando Postgrados por Materia "Ácido fólico"

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    Efecto del ácido fólico en la viabilidad, proliferación, morfología y diferenciación de células mesenquimales
    (2020) Bendahan Álvarez, Zita Carolina; Escobar Márquez, Lina María; González Carrera, María Clara; Castellanos P., Jaime Eduardo
    Antecedentes: El ácido fólico (FA) es la forma sintética del folato, obtenido por medio de la dieta o suplementos. Se ha determinado que la administración periconcepcional de suplementos de FA reduce los defectos del tubo neural; sin embargo, su efecto sobre la prevención de labio y paladar hendido (LPH) aún no es concluyente; así como tampoco es claro su mecanismo de acción en la diferenciación osteoblástica y formación ósea. Objetivo: Determinar el efecto del FA en la viabilidad, proliferación, morfología y diferenciación hacia linaje osteoblástico de células mesenquimales de pulpa dental (hDPSC). Metodología: Se aislaron, caracterizaron y trataron hDPSC con 0,8 y 1,6 mM de FA para evaluar cambios fenotípicos, en la proliferación celular y diferenciación hacia el linaje osteoblástico (rojo de alizarina, marcaje de ALP y expresión de marcadores de diferenciación osteogénica). Se evaluaron también cambios en la expresión y fosforilación de Smad1/5/8 y p38 mediante Western Blot. El análisis estadístico se realizó mediante ANOVA y Kruskal-Wallis. Esta investigación fue aprobada a nivel ético y financiada por la Universidad El Bosque. Resultados: El FA indujo cambios morfológicos y redujo la proliferación celular 12,5-14,8% a los seis días de tratamiento. El FA 0,8 mM promovió la actividad de ALP, la expresión de OSX, OP, OCN, RUNX2 y BMP2 y el aumento y activación temprana de p38. La vía de Smad1/5/8 también fue estimulada, aunque con menor intensidad que p38. Conclusiones: El tratamiento de células hDPSC con FA indujo cambios morfológicos y redujo la proliferación celular a partir del cuarto día de tratamiento, dependiente de la concentración de FA utilizada. La concentración 0,8 mM de FA promovió la diferenciación de las células hacia el linaje osteoblástico, como se comprobó con el incremento en el marcaje de ALP y la expresión de genes específicos de diferenciación: OSX, OP, OCN, RUNX2 y BMP2. El tratamiento con FA indujo activación y fosforilación temprana de p38, sin embargo, la vía de Smad1/5/8 también fue estimulada con menor intensidad.
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    Expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células mesenquimales de pulpa dental tratadas con ácido fólico y BMP2
    (2021-08-12) Delgado Parra, Julián David; Hernández Garcés, Daniel; Bendahan Álvarez, Zita Carolina; Escobar Márquez, Lina María; Mora Díaz, Ingrid Isabel; Castellanos Parra, Jaime Eduardo
    La incidencia mundial de trastornos óseos ha aumentado en los últimos años. y los injertos óseos son el tratamiento más frecuente, a pesar de sus complicaciones (rechazo, transmisión de enfermedades, disponibilidad limitada y morbilidad). La ingeniería de tejidos pretende desarrollar sustitutos biológicos que restablezcan la función de los tejidos alterados. Aunque la proteína morfogenética ósea (BMP2) y el ácido fólico (FA) son factores importantes para la formación y regeneración ósea, su efecto sobre las células mesenquimales (MSC) sigue siendo controvertido. Objetivo: Determinar la expresión de marcadores de diferenciación osteogénica en células madre de la pulpa dental humana (hDPSC) tratadas con FA y BMP2. Métodos: Las hDPSC aisladas y caracterizadas se trataron con dos concentraciones diferentes de FA y BMP2 para evaluar cambios fenotípicos mediante microscopía invertida, tasa de proliferación, mediante ensayo de resazurina, cambios en el ciclo celular mediante tinción con 7AAD y marcadores de diferenciación osteogénica: osterix (OSX), osteocalcina (OCN) y RUNX2 por PCR en tiempo real. Las variables cuantitativas se analizaron con las pruebas t de Student o ANOVA. Resultados: Las células tratadas con 1,6mM y 0,8mM de FA se observaron más alargadas y menos confluentes que las no tratadas (control), se observó una reducción en la proliferación en las células tratadas con FA, sin alterar el contenido de ADN ni el ciclo celular. BMP2 (50-100ng/ml) no generó cambios morfológicos, pero aumentó la proliferación celular 8,4%-6,4% y estimuló significativamente la expresión de RUNX2 y OSX en comparación con FA. Conclusiones: FA indujo cambios morfológicos y reducción en la proliferación de hDPSC, en contraste con BMP2, que indujo un aumento en el número de células. FA 0,8mM y BMP2 50ng/ml promovieron la diferenciación de hDPCs hacia el linaje osteoblástico, verificado con la expresión de: OSX, OCN, RUNX2. FA podría promover la formación de hueso, pero se necesitan más estudios para comprobar su efecto.