Caracterización de preferencias, fuente de alimento e infección natural por virus Oropuche en especies del género Culicoides spp. (Diptera: Ceratopogonidae) colectadas en el municipio de Puerto Carreño, Vichada, Colombia
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Resumen
El virus Oropouche (OROV) un ortobunyavirus emergente asociado a brotes epidémicos en Sudamérica y recientemente confirmado en humanos en Colombia, se consolida como uno de los más relevantes en el neotrópico, a pesar de su importancia, la identidad de los posibles vectores en el país sigue siendo incierta; en zonas urbanas de Brasil, se ha incriminado como vector a la especie Culicoides paraensis, dado que mediante estudios de infección experimental en laboratorio han encontrado que especies de este género permiten la diseminación viral, en contraste con especies de culícidos.
A pesar de contar con la especie C. paraensis dentro del territorio nacional, en Colombia se desconoce su papel como vector ni la posible implicación de otras especies de este género. Comprender la dinámica de alimentación de Culicoides recolectados en campo, así como su estatus de infección natural por OROV, permite inferir en las interacciones vector-hospedador y su relación con el ciclo de transmisión; por tal motivo, el presente estudio se centra como identificar potenciales vectores del virus Oropuche en Culicoides spp a partir de preferencias alimenticias e infección natural en hembras recolectadas en el municipio de Puerto Carreño, Vichada, Colombia.
El muestreo se llevó a cabo en Puerto Carreño (Vichada) durante dos transiciones estacionales, agosto–septiembre de 2024 (lluviosa–seca) y mayo de 2025 (seca–lluviosa), se utilizaron trampas CDC con luz UV en entornos urbanos y periurbanos, los especímenes fueron separados por sexo y estado de alimentación, posterior a esto se seleccionaron hembras alimentadas individualizadas y pools para extracción de ADN y ARN mediante kits comerciales y métodos convencionales, la amplificación molecular para fuente de alimento se llevó a cabo mediante primers específicos de humano y generalistas enfocados a mamíferos y aves (RT-PCR), por otro lado la detección del virus Oropuche se realizó mediante diferentes métodos de reacción en cadena de la polimerasa (q-PCR) dirigida a los segmentos L y S del genoma viral; en ambos casos los productos amplificados fueron analizados mediante electroforesis en gel y confirmados por secuenciación y análisis BLAST.
Se detectó infección natural por OROV en las especies, C. insignis, C. pusillus y C. guttatus, en donde se demostró una fuerte tendencia de preferencia por mamíferos domésticos, principalmente caballos (36%), seguidos de humanos (14%) y cerdos (9%) y a su vez la presencia de virus Oropuche a partir de la tasa minima de infección (TMI) (C. insignis TMI=55 TMI= 55, C. pusillus TMI=7 y C. guttatus TMI=6). Estos resultados amplían por primera vez el conocimiento sobre los posibles vectores de OROV en Colombia y proporcionan una base científica esencial para estudios de competencia vectorial y estrategias de vigilancia de arbovirus emergentes en ecosistemas de frontera.
Descripción
Abstract
The Oropouche virus (OROV), an emerging orthobunyavirus associated with epidemic outbreaks in South America and recently confirmed in humans in Colombia, is becoming one of the most relevant in the Neotropics. Despite its importance, the identity of the possible vectors in the country remains uncertain. In urban areas of Brazil, the species Culicoides paraensis has been implicated as a vector, since experimental infection studies in the laboratory have found that species of this genus allow viral dissemination, in contrast to culicid species.
Despite the presence of C. paraensis within the national territory, its role as a vector and the possible involvement of other species of this genus are unknown in Colombia. Understanding the feeding dynamics of Culicoides collected in the field, as well as their natural infection status with OROV, allows us to infer vector-host interactions and their relationship to the transmission cycle. Therefore, this study focuses on identifying potential vectors of the Oropouche virus in Culicoides spp. based on feeding preferences and natural infection in females collected in the municipality of Puerto Carreño, Vichada, Colombia.
Sampling was carried out in Puerto Carreño (Vichada) during two seasonal transitions, August–September 2024 (rainy–dry) and May 2025 (dry–rainy). CDC traps with UV light were used in urban and peri-urban environments. Specimens were separated by sex and feeding status. Subsequently, individual fed females and pools were selected for DNA and RNA extraction using commercial kits and conventional methods. Molecular amplification for food source was performed using human-specific primers and generalist primers focused on mammals and birds (RT-PCR). Oropouche virus detection was performed using different polymerase chain reaction (q-PCR) methods targeting the L and S segments of the viral genome. In both cases, the amplified products were analyzed by gel electrophoresis and confirmed by sequencing and BLAST analysis.
Natural infection with OROV was detected in the species C. insignis, C. pusillus, and C. guttatus, demonstrating a strong preference for domestic mammals, primarily horses (36%), followed by humans (14%) and pigs (9%). The presence of Oropuche virus was also confirmed based on the minimum infection rate (MIR) (C. insignis MIR=55, C. pusillus MIR=7, and C. guttatus MIR=6). These results expand, for the first time, our knowledge of potential OROV vectors in Colombia and provide an essential scientific basis for vector competence studies and surveillance strategies for emerging arboviruses in border ecosystems.
Palabras clave
Arbovirus, Jejenes, Vectores, Virus emergentes, Entomovirología