Modelo microcosmos de biopelícula dental para inducir in vitro la generación de lesiones de caries en dentina

Abstract

Antecedentes: La caries dental constituye un importante problema clínico y de salud pública, y los modelos experimentales in vitro sonesenciales para estudiar diferentes factores relacionados con la formación de las lesiones y evaluar estrategias remineralizantes y/orestauradoras bajo condiciones controladas. En la literatura actual, se observa una marcada heterogeneidad metodológica en los modelos debiopelícula, lo que limita la comparabilidad y la reproducibilidad en los resultados obtenidos. El presente estudio busca establecer un protocoloestandarizado y reproducible para generar lesiones de caries en dentina mediante un modelo de microcosmos derivado desaliva. Objetivo: Establecer un protocolo in vitro para la generación de lesiones de caries en dentina utilizando un modelo de biopelículamicrocosmos. Métodos: Se definieron dos objetivos específicos. En el primero se realizó una revisión de la literatura en las bases de datosPubMed, Scopus, EMBASE y Web of Science utilizando términos MeSH previamente acordados entre los investigadores. El siguienteobjetivo consistió en el diseño de la fase experimental correspondiente al objetivo dos el diseñó de un modelo experimental con base en losresultados de la revisión. Diez bloques de dentina humana (4 × 4 mm), almacenados en timol al 0.02 %, fueron adelgazados hasta obtenerun espesor de entre 80–100μm, se limpiaron mediante ultrasonido y se documentaron fotográficamente. Resultados: Objetivo 1: La revisiónbibliográfica evidenció una alta heterogeneidad entre los modelos de microcosmos reportados y permitió establecer un protocolo estandarizadoque integra los parámetros metodológicos más consistentes. Siete estudios cumplieron los criterios de inclusión, lo que permitió identificar lasvariables críticas y definir el protocolo propuesto. Las variables clave incluyeron el tipo de sustrato (dentina humana), el medio dealmacenamiento (timol al 0.2 %), la fuente de microbiota (saliva humana de dos donantes sanos), el manejo de la saliva (20 ml preservados conglicerina a −80 °C), el tamaño del disco de dentina (4 × 4 mm), el pulido (lija grano de hasta 600), la esterilización (radiación gamma), el medio decultivo (McBain con sacarosa al 1 %), el ambiente anaerobio y la frecuencia de exposición (2–3 veces al día). Objetivo 2: Siguiendo el protocoloestablecido, se prepararon discos de dentina a partir de molares humanos sanos. Los dientes se seccionaron para eliminar el esmalte y exponerla dentina coronaria, luego se pulieron con lija de grano 600 para obtener bloques estandarizados de 4 × 4 mm. Diez muestras se redujeron a 0.8mm de espesor se verificaron con indicador de carátula Mitutoyo, se limpiaron con alcohol isopropílico al 70 %, se sonicaron en agua desionizadadurante 15 minutos y se almacenaron individualmente en la solución de timol. Las fotomicrografías confirmaron la integridad de las superficiesde dentina sana. Conclusiones: La revisión de la literatura permitió identificar los parámetros experimentales más promisorios en modelos demicrocosmos para inducir caries en dentina, estableciendo una base metodológica sólida para un protocolo reproducible y estandarizado. Estoshallazgos permitieron sugerir un protocolo reproducible para la preparación de muestras de dentina humana sana en el laboratorio deUNICA para ser usados en posteriores retos microbiológicos que permitan establecer modelos microcosmos de caries en dentina garantizandocondiciones controladas, estandarizadas y reproducibles.