Determinación del potencial celulolítico de bacterias asociadas a compost de estiércol bovino y pasto

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Resumen

En este estudio, se determinó el potencial celulolítico de cepas bacterianas asociadas al compost de estiércol bovino. Para esto, se estableció un método de cribado para la identificación de cepas bacterianas con actividad celulolítica basado en el uso de rojo congo. Se evaluó de manera semicuantitativa la actividad celulasa de 49 cepas termotolerantes provenientes de la Colección de Trabajo del Banco de Microorganismos de Sistemas Agropecuarios Sostenibles. Estas cepas fueron aisladas del compostaje de estiércol bovino y pasto. Para esto, se calcularon los índices celulolíticos basados en halos de degradación de carboximeticelulosa revelados con rojo congo y una solución salina. De igual forma, la evaluación cuantitativa de la actividad celulasa de dieciséis cepas termotolerantes de la colección, que obtuvieron un índice celulolítico mayor a 65% y 14 nuevas cepas termófilas, fue determinada de dos formas. En la primera, se estimó los azúcares formados en caldo 1% carboximetilcelulosa después de 48 horas de incubación. Finalmente, 27 cepas de la colección se caracterizaron basados en el 16S rRNA. El 74.04% de estas cepas se identificó como pertenecientes al género Bacillus, el 10.11% al género Ralstonia, el 7.40% al género Undibacterium, y el resto correspondieron a los géneros Klebsiella, Zeimonas y Priestia cada uno con 3.70%. Como resultados, se evidenció que la cepa 39, la cual no ha sido aún identificada, obtuvo el mayor índice celulolítico a 37°C, con un valor de 81%. Las cepas 49 y 33, (aún no identificada y Bacillus licheniformis) lo obtuvieron a 50°C con valores mayores al 83%. En las evaluaciones cuantitativas, las cepas 7 (Bacillus licheniformis), 27 (aún no identificada) y 49 produjeron la mayor cantidad de azúcares reductores. Mientras que en la actividad enzimática los mejores resultados se observaron en las cepas 7, 11 (Bacillus licheniformis), 27 y 37 (Bacillus subtilis).

Descripción

Abstract

In this study, the cellulolytic potential of bacterial strains associated with bovine manure compost was determined. For this purpose, a screening method was established for the identification of bacterial strains with cellulolytic activity based on the use of congo red. The cellulase activity of 49 thermotolerant strains from the Working Collection of the Microorganism Bank of Sustainable Agricultural Systems was evaluated semi-quantitatively. These strains were isolated from the composting of bovine manure and pasture. For this, cellulolytic indices were calculated based on carboxymethyl cellulose degradation halos revealed with congo red and a saline solution. Similarly, the quantitative evaluation of the cellulase activity of sixteen thermotolerant strains of the collection, which obtained a cellulolytic index greater than 65% and 14 new thermophilic strains, was determined in two ways. In the first, the sugars formed in 1% carboxymethylcellulose broth after 48 hours of incubation were estimated. Finally, 27 strains from the collection were characterized based on 16S rRNA. Of these strains, 74.04% were identified as belonging to the genus Bacillus, 10.11% to the genus Ralstonia, 7.40% to the genus Undibacterium, and the rest corresponded to the genera Klebsiella, Zeimonas and Priestia each with 3.70%. The results showed that strain 39, which has not yet been identified, obtained the highest cellulolytic index at 37°C, with a value of 81%. Strains 49 and 33 (not yet identified and Bacillus licheniformis) obtained it at 50°C with values higher than 83%. In the quantitative evaluations, strains 7 (Bacillus licheniformis), 27 (not yet identified) and 49 produced the highest amount of reducing sugars. In enzymatic activity, the best results were observed for strains 7, 11 (Bacillus licheniformis), 27 and 37 (Bacillus subtilis).

Palabras clave

Actividad celulolítica, Bacterias, Compostaje, Azúcares reductores, Rojo congo

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