Optimización de un método analítico para la separación y cuantificación de flavonoides totales expresados en equivalentes de quercetina, en un extracto del hongo Pleurotus ostreatus mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)
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2024-04
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Resumen
El consumo del hongo Pleurotus ostreatus ha aumentado debido a sus grandes beneficios para la salud y su elevado contenido de flavonoides, como la quercetina. Por ende, este estudio se centra en la obtención de un extracto etanólico a partir del material fúngico, con el propósito de establecer un método eficiente para la separación y cuantificación de flavonoides totales en términos de quercetina mediante Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC), optimizando las condiciones predefinidas en investigaciones previas. Se llevaron a cabo extracciones con diversos solventes, seguidas de una prueba de tricloruro de aluminio para determinar la cantidad de flavonoides y seleccionar el solvente óptimo para su análisis en HPLC. Las condiciones cromatográficas se establecieron con una fase móvil de acetonitrilo:agua (35:65), columna C8, temperatura de 25°C, flujo isocrático de 1,0mL/min, volumen de inyección de 3µL y longitud de onda de detección de 254nm. La cuantificación del analito se realizó mediante el método de adición estándar, obteniendo una concentración de 40,990ppm. Los parámetros de validación demostraron una exactitud del 99,824% y una resolución de 1,200, lo que confirma la optimización y validación adecuada del método.
Descripción
Abstract
The Pleurotus ostreatus mushroom consumption has increased due to its great health benefits and high content of flavonoids, such as quercetin. Therefore, this study is focused on obtaining an ethanolic extract from fungal material, with the purpose of establishing an efficient method for the separation and quantification of total flavonoids in terms of quercetin using High Resolution Liquid Chromatography (HPLC), optimizing predefined conditions in previous research. Extractions were carried out with different solvents, followed by an aluminum trichloride test to determine the amount of flavonoids and select the optimal solvent for analysis in HPLC. The chromatographic conditions were established with a mobile phase of acetonitrile:water (35:65), C8 column, temperature of 25°C, isocratic flow of 1.0mL/min, injection volume of 3µL and detection wavelength of 254nm. The analyte quantification was carried out using the standard addition method, obtaining a concentration of 40,990 ppm. The validation parameters demonstrated an accuracy of 99.824% and a resolution of 1.200, confirming proper optimization and validation of the method.
Palabras clave
Quercetina, Validación, Pleurotus ostreatus
Keywords
Quercetin, Validation, Pleurotus ostreatus