Performance of disk diffusion and broth microdilution for fosfomycin susceptibility testing of multidrug-resistant clinical isolates of Enterobacterales and Pseudomonas aeruginosa

Resumen

Objetivos: Este estudio tuvo como objetivo evaluar la susceptibilidad de aislados clínicos de Enterobacterales y Pseudomonas aeruginosa a fosfomicina y determinar la concordancia de difusión en disco (DD) y microdilución en caldo (DMO) con dilución en agar (AD) para pruebas de susceptibilidad a fosfomicina. Métodos: La actividad de la fosfomicina contra 225 aislamientos clínicos de Escherichia coli ( n  = 64), Klebsiella pneumoniae ( n  = 68), Enterobacter spp. ( n  = 28) y P. aeruginosa ( n  = 65) fue probado por AD, DD y BMD. Para DD, los resultados se registraron considerando y no considerando las colonias que crecen dentro del halo de inhibición según lo recomendado por CLSI y EUCAST, respectivamente. Se utilizaron puntos de corte de Escherichia coli para todos los Enterobacterales. Los resultados se informaron como acuerdo categórico (CA), error mayor (ME; falso resistente), error muy mayor (VME; falso susceptible) y error menor (cualquier otra discrepancia). Resultados: La susceptibilidad a la fosfomicina de todas las especies analizadas fue> 90% en la EA. Siguiendo las pautas de CLSI, DD fue el único método que alcanzó ≥90% de CA con AD para E. coli y K. pneumoniae , aunque arrojó un 6% de ME. Ni DD ni BMD alcanzaron porcentajes aceptables de CA para Enterobacter spp. Siguiendo las pautas de EUCAST, ninguno de los métodos tuvo CA ≥ 90%. Para Enterobacterales, el mejor desempeño de DD se logra cuando se lee según lo indicado por EUCAST pero se interpreta de acuerdo con los puntos de corte CLSI (> 97% CA; 0% VME; ≤2% ME). Para P. aeruginosa , la DMO arrojó los mejores resultados (89% CA; 0% VME; 11% ME). Conclusión: Ni la DD ni la DMO proporcionan resultados precisos debido a porcentajes inaceptables de EM y EMV incluso cuando se realizan según lo previsto por las directrices.

Descripción

Abstract

Objectives: This study aimed to evaluate the susceptibility of clinical isolates of Enterobacterales and Pseudomonas aeruginosa to fosfomycin and to determine the concordance of disk diffusion (DD) and broth microdilution (BMD) with agar dilution (AD) for fosfomycin susceptibility testing. Methods: The activity of fosfomycin against 225 clinical isolates of Escherichia coli (n = 64), Klebsiella pneumoniae (n = 68), Enterobacter spp. (n = 28) and P. aeruginosa (n = 65) was tested by AD, DD and BMD. For DD, results were recorded considering and not considering colonies growing within the inhibition halo as recommended by the CLSI and EUCAST, respectively. Escherichia coli breakpoints were used for all Enterobacterales. Results were reported as categorical agreement (CA), major error (ME; false-resistant), very major error (VME; false-susceptible) and minor error (any other discrepancies). Results: Fosfomycin susceptibility of all tested species was >90% by AD. Following CLSI guidelines, DD was the only method reaching ≥90% CA with AD for E. coli and K. pneumoniae, albeit yielding 6% ME. Neither DD nor BMD achieved acceptable CA percentages for Enterobacter spp. Following EUCAST guidelines, none of the methods had CA ≥ 90%. For Enterobacterales, the best performance of DD is achieved when read as indicated by EUCAST but interpreted according the CLSI breakpoints (>97% CA; 0% VME; ≤2% ME). For P. aeruginosa, BMD yielded the best results (89% CA; 0% VME; 11% ME). Conclusion: Neither DD or BMD provide accurate results owing to unacceptable ME and VME percentages even when performed as intended by the guidelines.

Palabras clave

Fosfomicina, Actividad antimicrobiana, Enterobacterales, Pseudomonas aeruginosa, Pruebas de susceptibilidad

Keywords

Fosfomycin, Antimicrobial activity, Enterobacterales, Pseudomonas aeruginosa, Susceptibility tests

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