PCR en tiempo real. Modelo de aplicación en dengue
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Fecha
2011
Título de la revista
Publicado en
Colombia Médica, 1657-9534, Vol. 42, No. 2, 2011 p. 243-258
Publicado por
Facultad de Salud de la Universidad del Valle
ISSN de la revista
Título del volumen
Resumen
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una herramienta usada de rutina en todos los laboratorios de diagnóstico e investigación. Esta técnica se utiliza en detección de mutaciones y patógenos, investigación forense, e incluso es la base para la secuenciación del genoma humano. Una modificación de la PCR, la PCR en tiempo real, permite la cuantificación de ácidos nucleicos con mayor sensibilidad, especificidad y reproducibilidad. Este artículo pretende revisar los principios de PCR en tiempo real y exponer un modelo de aplicación en virología en el que se cuantificó el número de copias virales producido a partir de macrófagos murinos infectados con virus dengue 2; los resultados obtenidos establecieron que la cepa murina BALB/c presenta una mayor susceptibilidad a la infección por virus dengue, lo que permite establecer esta cepa de ratones como un mejor modelo de estudio para la investigación de la fisiopatología de la infección por virus dengue.
Descripción
Abstract
PCR (polymerase chain reaction) is a routinely used tool in every diagnostic and research laboratory. This technique has been used in detection of mutations and pathogens, forensic investigation, and even is the base tool for human genome sequencing. A modification of PCR technique, real time PCR, allows the quantification of nucleic acids with higher sensibility, specificity and reproducibility. This article is intended to clarify the foundations of real-time PCR, using an application model for virology. In the actual work, it was quantified the viral load of dengue virus serotype 2 produced from infected murine macrophages; the obtained results in this work established that murine strain BALB/c presents a greater susceptibility to dengue virus infection, which establishes BALB/c murine strain as a best model of study for investigation of dengue virus infection physiopathology.
Palabras clave
PCR, PCR en tiempo real, Biología molecular, Virus dengue, Gen housekeeping.
Keywords
PCR, Real time PCR, Molecular biology, Dengue virus, Housekeeping gene