Efecto de Porphyromonas gingivalis en la activación y adhesión de plaquetas humanas en co-cultivo con células endoteliales de arteria coronaria humana

Resumen

Estudios epidemiológicos han evaluado la asociación de periodontitis como factor de riesgo de enfermedades cardiovasculares, ha sido respaldada por el aislamiento e identificación de periodontopatógenos en placas ateroscleróticas, siendo Porphyromonas gingivalis el más reportado, así como su lipopolisacárido (LPS). Estudios de experimentación P. gingivalis puede inducir la producción de citoquinas proinflamatorias activan mecanismos que estimulan la producción de factores proagregantes plaquetarios como el factor Von Willebrand y tromboxano A2; la activación plaquetaria y subsecuente agregación, en la activación de células endoteliales que implica la expresión o liberación de varios factores como las moléculas de adhesión P-electina, VECAM-1, PECAM-1 conllevan la progresión de procesos ateroescleróticos. Sin embargo, la mayoría de estudios se han desarrollado en cultivos de células en monocapa o en modelos de co-cultivo en células de cordón umbilical (HUVEC). Evaluar el efecto de la bacteria completa y el lipopolisacárido de Porphyromonas gingivalis W83 en la activación y adhesión de plaquetas humanas en co-cultivo con células de arteria coronaria humana (HCAEC). Estudio experimental in vitro. Se desarrolló un modelo de co-cultivo con plaquetas humanas y células HCAEC, el cual se estimuló con LPS (1,0 3,5 y 7,0 µg/mL) bacteria completa de P. gingivalis (MOI: 100) a dosis repetidas. Se evaluó mediante citometría de flujo las moléculas de adhesión (P/E-selectina), activación (PAC) y mediante ELISA el tromboxano A2. EL LPS de P. gingivalis induce un aumento de la expresión de PAC y P/E -selectina en plaquetas a la máxima concentración evaluada 7,0 µg/mL, mientras que la bacteria completa indujo un aumento solo de P/Eselectina en plaquetas en comparación frente a control. No se presentó cambios significativos en la expresión de estas moléculas en células HCAEC (p<0,05). Porphyromonas gingivalis induce un aumento de la expresión de moléculas de adhesión y activación plaquetaria en un modelo de co-cultivo con HCAEC, demostrando in vitro el efecto de este periodontopatógeno sobre la activación y progresión de procesos ateroescleróticos.

Descripción

Abstract

Epidemiological studies have evaluated the association of periodontitis as a risk factor for cardiovascular diseases, which has been supported by the isolation and identification of periodontopathogens in atherosclerotic plaques, being Porphyromonas gingivalis the most reported as well as its lipopolysaccharide (LPS). In experimental studies, P. gingivalis can induce the production of proinflammatory cytokines activating mechanisms that stimulate the production of platelet pro-aggregatory factors such as Von Willebrand factor and thromboxane A2. Platelet activation and subsequent aggregation, in the activation of endothelial cells that involves the expression or release of several factors such as adhesion molecules P-Selectin, VCAM-1, PECAM-1 involve the progression of atherosclerotic processes. However, most studies have been developed in monolayer cell cultures or in co-culture models in umbilical cord cells (UCC). To evaluate the effect of the complete bacterium and the lipopolysaccharide of Porphyromonas gingivalis W83 on human platelets activation and adhesion in co-culture with human coronary artery endothelial cells (HCAEC). In vitro experimental study. A co-culture model was developed with human platelets and HCAEC, stimulated with LPS (1,0 3,5 and 7,0 μg/mL). Complete bacterium of P. gingivalis (MOI: 100) at repeated doses. The adhesion molecules (P/E-selectin), activation (PAC) were evaluated by flow cytometry and thromboxane A2 was evaluated with ELISA. The LPS of P. gingivalis induces an increase in the expression of PAC and P/E -selectin in platelets at the maximum concentration evaluated 7.0 μg/mL, while the complete bacterium induced an increase only of P/E- selectin in platelets compared to control. There were no significant changes in the expression of these molecules in HCAEC cells (p <0.05). Porphyromona gingivalis induces an increase in the expression of adhesion molecules and platelet activation in a co-culture model with HCAEC, demonstrating in-vitro the effect of this periodontopathogens on the activation and progression of atherosclerotic processes. atherosclerotic processes.

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