Caracterización de un modelo murino de cultivos primarios de ganglio trigeminal enriquecido en neuronas para el estudio del efecto antiviral del interferón-β frente al virus Herpes simple tipo 1
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Fecha
2014
Título de la revista
Publicado en
Infectio, 0123-9392, Vol. 18, num. 2, 2014, p. 37-44
Publicado por
Asociación Colombiana de Infectología
ISSN de la revista
Título del volumen
Resumen
Objetivo: Caracterizar un cultivo primario de ganglio trigeminal (GT) enriquecido en neuronas
y evaluar la expresión de interferón- y su actividad frente a la infección con Herpes simple
tipo 1 (HSV-1).
Materiales y métodos: El porcentaje de neuronas fue determinado por inmunocitoquímica para
neurofilamento. Los cultivos fueron tratados con interferón- e infectados con HSV-1, y se
cuantificaron las células positivas para antígeno viral por inmunocitoquímica y la expresión de
interferón- por PCR cuantitativa.
Resultados: El cultivo presentó un 15% de neuronas y 85% de células no neuronales. Se encontró
efecto citopático, asociado a una alta diseminación de la infección (72,9% neuronas y 48,3%
de células no neuronales positivas para antígeno viral). El interferón- evitó la aparición de
efecto citopático y disminuyó las células infectadas a 16,7% en neuronas y a 7,8% las células
no neuronales. La infección viral incrementó la expresión de transcritos de interferón- 18,2
veces a las 6 h de infección, mientras que a las 18 h post infección el tratamiento con interferón
incrementó esta expresión 3,7 veces.
Discusión: Los cultivos presentaron un 15% de neuronas, lo cual es 10 veces más que en otros
cultivos reportados. Las células no neuronales representan el 85% de las células del cultivo,
y se evidenció que todos los tipos de células se infectaron; similar a lo que ha sido reportado
durante infecciones agudas in vivo. Adicionalmente, el interferón- disminuyó el porcentaje de
células infectadas y evitó la aparición de efecto citopático, similar a lo que ha sido reportado
en cultivos de GT porcino.
Conclusiones: Se caracterizó un modelo de cultivo primario de GT enriquecido en neuronas.
Interferón- protegió las células del efecto citopático y la diseminación viral mientras que la
infección viral incrementó la expresión de interferón-. Por lo tanto, el interferón- ejerció un
papel antiviral importante frente al HSV-1 en estos cultivos.
Descripción
Abstract
Objective: To characterize a neuron-enriched primary TG culture and evaluate interferon-
expression and activity after HSV-1 infection.
Materials and methods: The percentage of neurons present in cultures was assessed by neurofilament immunocytochemistry. Cultures were treated with interferon- and infected with
HSV-1, then viral antigen positive cells were counted and interferon- expression was assessed
by quantitative PCR.
Results: The culture contained 15% neurons and 85% non-neuronal cells. A cytopathic effect was
observed, associated with high viral spread (72.9% neurons and 48.3% non-neuronal cells were
positive for viral antigen). Interferon- treatment impaired the cytopathic effect and decreased
the infected neurons to 16.7% and infected non-neuronal cells to 7.8%. Viral infection at 6 h postinfection significantly increased the interferon- transcripts by 18.2 fold, while at 18 h postinfection Interferon pre-treatment in infected cultures increased interferon- transcription by
3.7 fold.
Discussion: This culture model contained 15% neurons, which is 10 times higher compared to
other reported cultures, and non-neuronal cells comprised 85% of cells in this culture. All types
of cells were found to be infected, which is similar to that reported during acute infections
in vivo. Additionally, interferon- decreased the infected cells, avoiding the cytopathic effect,
which is similar to that reported in swine TG cultures.
Conclusions: A neuron-enriched primary TG model was characterized. Interferon- treatment
protected cells from cytopathic effects and viral spread, while viral infection up-regulated
interferon- expression. This result means that interferon- exerts an important antiviral effect
against HSV-1 in these culture
Palabras clave
HSV-1, Ganglio trigeminal, Interferón-β
Keywords
Temáticas
Neuronas
Inmunohistoquímica
Enfermedades virales del sistema nervioso central
Inmunohistoquímica
Enfermedades virales del sistema nervioso central