Relaxin treatment stimulates the differentiation of mesenchymal stem cells into osteoblasts

Resumen

Resumen Antecedentes/objetivo: Varios estudios han determinado que la relaxina estimula la diferenciación y regula la actividad de los osteoclastos maduros, pero se sabe poco sobre su efecto en la diferenciación de las células mesenquimales hacia el linaje osteogénico. Por lo tanto, este estudio tuvo como objetivo determinar el efecto de la relaxina sobre la proliferación y diferenciación del linaje osteoblástico de células mesenquimales derivadas de pulpa dental humana (hDPSC). Materiales y métodos: En este estudio in vitro, las hDPSC fueron caracterizadas y tratadas con relaxina a diferentes dosis (10e80 ng/ml) y tiempos (1e21 días). La morfología se evaluó mediante microscopía y la proliferación mediante un ensayo de resazurina. La diferenciación osteoblástica se evaluó mediante tinción con rojo alizarina, marcaje con fosfatasa alcalina (ALP) y cambios en la expresión de los genes de diferenciación osteoblástica RUNX2 y BMP2. Resultados: El tratamiento con relaxina no indujo cambios en la proliferación o viabilidad de las hDPSCs; sin embargo, se observaron células más grandes y una mayor prolongación citoplasmática. El tratamiento con relaxina (20 y 80 ng/ml) aumentó significativamente la formación de nódulos calcificados en los días 14 y 21. Las señales citoquímicas para la expresión de los genes ALP, RUNX2 y BMP2 aumentaron significativamente (P < 0,05) con el tratamiento con relaxina.

Descripción

Abstract

Abstract Background/purpose: Several studies have determined that relaxin stimulates differentiation and regulates the activity of mature osteoclasts, but little is known about its effect on the differentiation of mesenchymal cells towards the osteogenic lineage. Therefore, this study aimed to determine the effect of relaxin on the proliferation and differentiation of the osteoblastic lineage of mesenchymal cells derived from human dental pulp (hDPSC). Materials and methods: In this in vitro study, hDPSC were characterized and treated with relaxin at different doses (10e80 ng/ml) and times (1e21 days). Morphology was assessed by microscopy, and proliferation was assessed using a resazurin assay. Osteoblastic differentiation was evaluated by Alizarin Red staining, alkaline phosphatase (ALP) labeling, and changes in the expression of the osteoblastic differentiation genes RUNX2 and BMP2. Results: Relaxin treatment did not induce changes in the proliferation or viability of hDPSCs; however, larger cells and increased cytoplasmic prolongation were observed. Relaxin treatment (20 and 80 ng/ml) significantly increased calcified nodule formation on days 14 and 21. The cytochemical signals for ALP, RUNX2, and BMP2 gene expression were significantly (P < 0.05) increased by the relaxin treatment.

Palabras clave

Diferenciación celular, Proliferación celular, Viabilidad celular, Células madre mesenquimales, Diferenciación osteogénica, Relaxina

Keywords

Cell differentiation, Cell proliferation, Cell viability, Mesenchymal stem cells, Osteogenic differentiation, Relaxin

Temáticas

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