Evaluación de la secreción de TGF-β de las células troncales de pulpa dental, estimuladas con IFN-γ y TNF-α
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2020
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Resumen
Se ha demostrado que las células troncales de pulpa dental humana [DPSC´s] tienen la capacidad de secretar factores solubles característicos anti-inflamatorios como el factor de crecimiento transformante beta [TGF-β] sin afectar sustancialmente la proliferación y capacidad de supervivencia celular, cuando son estimuladas por citoquinas como el interferón gamma [IFN-γ] y factor de necrosis tumoral alpha [TNFα]. El TGF-β es una de las citoquinas más producida por las DPSC´s ante reacciones inmunológicas, inhibie la proliferación y activación de las células T por medio del dipropano de metilo-1 y la indometacina; además permite la activación de las células T reguladoras por una disminución de la IL-17 en el microambiente, diferenciando las DPSC´s a un perfil osteogénico que permita la regeneración ósea. Evaluar la capacidad de secreción TGF- β de las células troncales de pulpa dental bajo el estímulo de las citoquinas IFN-γ y TNF-α en un modelo in vitro. Se utilizaron DPSC´s post-criopreservadas, cada muestra estuvo constituida pozos de 1000, 500 o 250 células que fueron estimuladas por dos citoquinas; TNF-α y IFN- γ, a tres concentraciones [200ng/ml, 100ng/ml o 50ng/ml]. La secreción de TGF-β fue evaluada 24 horas después de haber sido estimuladas mediante la técnica de ELISPOT. Los datos fueron analizados estadísticamente por la prueba de prueba de Kruskal-Wallis y U de Mann-Whitney. La estimulación con IFN-γ a diferentes concentraciones no demostró una diferencia significativa, pero si entre los diferentes números de células, debido a que se observó que a menor número de células hubo mayor producción de TGF – β. Se evidenció secreción eventual de TGF- β, bajo el estímulo de TNF-α de las DPSC’s a las diferentes concentraciones, así como en diferentes cantidades celulares. De acuerdo a las limitaciones de este estudio se puede concluir que hubo más secreción de TGF- β al ser estimulada con IFN-γ que con TNF-α sin embargo no fue estadísticamente significativo.
Descripción
Abstract
It has been proven that human dental pulp stem cells DPSCs have the ability to secrete characteristic anti-inflammatory soluble factors such as the transforming growth factor beta TGF-β without substantially affecting proliferation and cell survival capability when stimulated with cytokines such as interferon gamma IFN-γ and the tumour necrosis factor alpha TNF-α. The TGF-β is one the most produced cytokines by DPSCs due to immunological reactions, hinders proliferation and activation of T cells by means of metil-1 dipropylene and indomethacine; additionally, it allows the activation of regulating T cells by a decrease of IL-17 in the microenvironment, differentiating the DPSCs to an osteogenic profile which permits osseous regeneration. To evaluate the secretion of TGF- β from DPSCs stimulated by cytokines IFN-γ and TNF-α in an in-vitro model. Post-cryopreserved DPSCs were used in samples of 1000 cells, 500 cells or 250 cells stimulated by IFN-γ and TNF-α in concentrations of 200ng/ml, 100ng/ml o 50ng/ml. The secretion of TGF-β was evaluated 24 hours later with the ELISPOT technique and data was analysed statistically with the Kruskal-Wallis and U de Mann-Whitney tests. The stimulus with different concentrations of IFN-γ did not present a significant difference, as it did among varying cell counts where it was seen that lower cellular concentration generated higher TGF – β production. There was also evidence of TGF – β secretion stimulated by DPSCs TNF-α with different concentrations and cell quantities. The limitations of the present study allow to conclude that there was greater secretion of TGF- β when stimulated with IFN-γ than with TNF-α. However, this was not statistically significant.