Comparación entre susceptibilidad antibiótica y presencia de genes de resistencia en P. intermedia y P. nigrescens
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2018
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Resumen
El género Prevotella pertenece a la microbiota oral normal. Sin embargo, son aislados comúnmente de infecciones polimicrobianas, las cuales se manejan frecuentemente con tratamiento mecánico. En algunos pacientes es necesario un tratamiento antibiótico adicional. Este género, es muy importante a nivel clínico debido a su amplio perfil de resistencia frente a varias familias de antibióticos utilizados en el campo de la odontología como son β-lactámicos, Tetraciclinas y Macrólidos. Adicionalmente se cree pueden funcionar como reservorio de genes de resistencia antibiótica. Comparar la susceptibilidad antibiótica y la presencia de genes de resistencia en Prevotella intermedia y Prevotella nigrescens. Estudio experimental in vitro. Se evaluaron 1200 aislamientos orales de Prevotella spp previamente y se confirmó la especie de P. intermedia y P. nigrescens por PCR. Se determinó la frecuencia de genes de resistencia en las especies de Prevotella identificadas por PCR convencional. La susceptibilidad antibiótica, se evaluó mediante el método de dilución en agar sobre placas de agar brucella suplementado con hemina, menadiona y sangre de cordero, además de concentraciones de antibióticos desde 0.25µg/mL hasta 64µg/mL. Como control positivo se usó Bacteroides fragilis ATCC 25285. La interpretación de los resultados de la actividad in vitro de los antibióticos se realizó según los puntos de corte reportados por el CLSI. Se realizó análisis descriptivo de los datos. Resultados: los aislamientos clínicos de P. intermedia y P. nigrescens portan los genes de resistencia cfxA 37%, cfxA 2 2%, bla TEM 17%, tetM29%, tetQ 46% y ermF 22%; y presentan resistencia a los antibióticos de primera elección en Odontología como amoxicilina (67,3%) seguido por clíndamicina (35,1%), Amoxicilina-ácido clavulánico (27,7%) y metronizadol (18,2%). P. intermedia y P. nigrescens son un reservorio importante de genes que codifican para resistencia antibiótica frente a la terapia de primera y segunda elección en odontología y están expresando estos genes de resistencia, lo cual podría favorecer eventos de transferencia genética entre la microbiota normal, transeúnte y patógena complicando el manejo procesos infecciosos en la cavidad oral.
Descripción
Abstract
The genus Prevotella belongs to the normal oral microbiota. However, it is usually isolated from poly-microbial infections which are usually treated with mechanic means but some patients require additional antibiotic treatment. The genus is very important clinically because it has an ample resistance profile to several antibiotic families used in dentistry such as β-lactamines, tetracyclines and macrolides. It is believed they can act as a reservoir of antibiotic resistance genes. To compare the antibiotic susceptibility and presence of resistance genes in Prevotella intermedia and Prevotella nigrescens. Experimental in vitro study which evaluated 1200 oral isolations of Prevotella spp and confirmed presence of P. intermedia and P. nigrescens by means of PCR. The frequency of resistance genes in Prevotella was determined with conventional PCR. Antibiotic susceptibility was evaluated by means of agar dilution on brucella agar plaques supplemented with haemin, menadione, lamb’s blood and concentrations of antibiotics from 0.25µg/mL to 64µg/mL. Bacteroides fragilis ATCC 25285 was used as a positive control, interpretation of results of in vitro activity of the antibiotics was done following the milestones reported by the CLSI and a descriptive analysis of data was carried out. Clinical isolations of P. intermedia and P. nigrescens carry the genes with frequency of cfxA 37%, cfxA 2 2%, bla TEM 17%, tetM29%, tetQ 46% and ermF 22%; they present resistance to first-choice dental antibiotics such as amoxicillin (67.3%), clindamycin (35.1%), amoxicillin-clavulanic acid (27.7%) and metronidazole (18.2%). P. intermedia and P. nigrescens are an important reservoir of genes that code for antibiotic resistance against the first and second choice therapy in dentistry and are expressing these resistance genes, which could favor genetic transfer events between the normal microbiota, transient and pathogenic complicating the management of infectious processes in the oral cavity.