Efecto de aggregatibacter actinomycetemcomitans en la activación y adhesión de plaquetas humanas en co-cultivo con células endoteliales

Resumen

Los estudios epidemiológicos han establecido una asociación clínica entre la enfermedad periodontal y la aterosclerosis. Los episodios de bacteriemia y endotoxemia en pacientes con periodontitis parecen vincular estas dos enfermedades al inducir una producción de marcadores cardiovasculares en todo el cuerpo. La presencia de bacterias orales en lesiones ateroscleróticas en pacientes con periodontitis sugiere que las bacterias, o sus componentes antigénicos, inducen alteraciones en el endotelio asociado con la aterosclerosis. Por lo tanto, se puede construir un mecanismo causal que explique la asociación entre ambas enfermedades utilizando modelos in vitro. Se ha demostrado anteriormente que la disfunción endotelial, se asocia con un aumento de la expresión de algunas moléculas de adhesión (PECAM-1, VECAM-1 y Pselectina), así como la activación de las plaquetas; del mismo modo muestran la correlación existente entre P-selectina y su efecto proagregante plaquetario y la progresión de las enfermedades cardiovasculares. Evaluar la expresión y el efecto del LPS de A. actinomycetemcomitans sobre la adhesión y activación de plaquetas humanas en células endoteliales. Se elaboró un modelo de co-cultivo con plaquetas humanas y células HCAEC, el cual se estimuló con LPS de A. actinomycetemcomitans (1,0 3,5 y 7,0 µg/mL) a dosis repetidas. Se evaluaron la molécula de adhesión (P-selectina) y activación (PAC) por medio de citometría de flujo y Tromboxano A2 mediante ELISA. Se evidencio que el LPS de A. actinomycetemcomitans induce un aumento en la expresión de P-selectina y tromboxano A2 en células endoteliales HCAEC a una concentración de 7.0 µg/DC y 3.5 µg/dL respectivamente en relación al control SE. No se encontraron cambios significativos en la expresión de esta molécula en plaquetas (p <0,05). El LPS de A. actinomycetemcomitans induce un aumento de la expresión de P-selectina en células endoteliales HCAEC lo cual sugiere un efecto de esta bacteria sobre adhesión en procesos aterotrombóticos.

Descripción

Abstract

Epidemiological studies have established a clinical relation between periodontal disease and atherosclerosis. Bacteremia and endotoxemia episodes in patients with periodontitis seen to relate these two diseases by inducing a production of cardiovascular markers throughout the body. Presence of oral bacteria in atherosclerotic lesions in patients with periodontitis suggests the bacteria, or its antigen components, induce alterations in the endothelium leading to such association. A causal mechanism may be developed which explains such association using in vitro models. It has been shown that an endothelial dysfunction is associated with the increment in the expression of some adhesion molecules (PECAM-1, VECAM-1 and P-selectin) as well as platelet activation; the relation between P-selectin, its platelet pro-aggregating effect and the progression of cardiovascular diseases has been shown as well. To evaluate the expression and effect of A. actinomycetemcomitans on adhesion and activation of human platelets on endothelial cells. A culture with human platelets and HCAEC cells was put together and stimulated with LPS of A. actinomycetemcomitans (1,0 3,5 and 7.0 µg/mL) with repetitive dosages. The adhesion molecule (P-selectin) and activation (PAC) were evaluated with flow cytometry and thromboxane A2 with ELISA. It was evidenced that the LPS of A. actinomycetemcomitans induces an increment of the expression of P-selectin and thromboxane A2 in HCAEC endothelial cells with a concentration of 7.0 µg/DC y 3.5 µg/dL respectively with relation to the SE control. No significant changes were found on the expression of these platelets (p<0.05). The LPS of A. actinomycetemcomitans induces an increment of in the expression of Pselectin and HCAEC endothelial cells suggesting an effect of this bacteria on the adhesion of atherothrombotic processes.

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